注意事項:
1.美洲四棱線蟲PCR試劑盒說明書基礎(chǔ)程序;
2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;
3.反應(yīng)時間;
4.循環(huán)次數(shù);
5.PCR 反應(yīng)液的配制;
6.PCR技術(shù)的基本原理;
7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);
8.PCR擴增產(chǎn)物;
9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
以下是美洲四棱線蟲PCR試劑盒說明書的詳細(xì)說明書:
產(chǎn)品名稱:?美洲四棱線蟲PCR試劑盒說明書
英文名稱:Tetrameres americanaPCR
編號:FS-P1337
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。公司即用型PCR試劑盒:
美洲四棱線蟲PCR試劑盒說明書參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3'端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3'端的堿基,特別是末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴增的靶序列有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增,且可增加引物之間形成二聚體的機會。
2H-1,2,3-三氮唑-2-乙酸 分類: 化學(xué),催化和無機化學(xué),
4-溴-3-甲氧基 分類: 化學(xué),催化和無機化學(xué),
2-溴-4-甲氧基分類: 化學(xué),催化和無機化學(xué),
N-甲基高 分類: 化學(xué),催化和無機化學(xué),
反,反-2,4-庚二烯醛 分類: 化學(xué),催化和無機化學(xué),
2-氟丙烯酸 分類: 化學(xué),催化和無機化學(xué),
5-甲基-3,4-二氫噻吩并[2,3-D]嘧啶-4-酮 分類: 化學(xué),催化和無機化學(xué),
2-氯-6煙腈 分類: 化學(xué),催化和無機化學(xué),
3,5-二甲基-4-氨基吡啶 分類: 化學(xué),催化和無機化學(xué),
2-氨基-3-羥基吡嗪 分類: 化學(xué),催化和無機化學(xué),
3-氨基-4-乙基吡唑草酸鹽 分類: 化學(xué),催化和無機化學(xué),
4-氰基四氫吡喃 分類: 化學(xué),催化和無機化學(xué),
培養(yǎng)基原材料 月示蛋白胨 400g
細(xì)菌生化鑒定 粘液酸鹽測試肉湯 20支/盒
細(xì)菌生化鑒定 粘液酸鹽質(zhì)控肉湯 20支/盒
細(xì)菌生化鑒定 蔗糖生化鑒定管 20支/盒
用于志賀氏菌的分離和初步鑒別。 志賀氏菌顯色瓊脂平板 90mmX20個
美洲四棱線蟲PCR試劑盒說明書
用于致病性嗜水氣單胞菌的培養(yǎng),供斑點酶聯(lián)免疫試驗用(GB/T 18652-2002) 蔗糖胰蛋白胨肉湯 250g
用于監(jiān)視蒸汽的自含式生物指示劑 蒸汽滅菌芽孢條 100支/盒
用于志賀氏菌生化鑒定 志賀氏菌生化鑒定盒 17種×10次/盒
志賀氏菌顯色培養(yǎng)基 志賀氏菌顯色培養(yǎng)基 1000ml/瓶
反應(yīng)五要素:
美洲四棱線蟲PCR試劑盒說明書是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品, 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分,用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng),具有廣泛的用途。
1. 方便,用戶只需準(zhǔn)備模板和引物既可以進行PCR 實驗。
2. 快捷,操作步驟已經(jīng)限度地簡化,能減少污染,降低實驗誤差。
3. 本產(chǎn)品A 型含電泳染料,PCR 反應(yīng)液可直接上樣電泳,進一步簡化了操作。
4. 由于各成分的濃度和比例都經(jīng)過精心優(yōu)化,反應(yīng)的靈敏度高,特異性強。能擴增各種常見的DNA 樣品。
5. 產(chǎn)物可直接用于T 載體克隆,不需要額外的加A 反應(yīng)。
使用及效果:將本產(chǎn)品15 μL 與用戶自備的模板,引物和水共15 μL 混合后,直接進行PCR反應(yīng)(PCR 參數(shù)由用戶自己確定),反應(yīng)結(jié)束后直接取10 μL 電泳檢查擴增結(jié)果。
以下是美洲四棱線蟲PCR試劑盒說明書的相關(guān)產(chǎn)品: