細胞傳代步驟:
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
1. 棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
細胞簡介:
大鼠肺微血管平滑肌分離自肺組織;肺是機體的呼吸器官,位于胸腔,左右各一,覆蓋于心之上。肺有分葉,左二右三,共五葉。肺經肺系(指氣管、支氣管等)與喉、鼻相連,故稱喉為肺之門戶,鼻為肺之外竅。肺血管平滑肌細胞原代分離培養3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態大小不一,呈梭形、不規則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態學特征和生長特點。肺血管平滑肌細胞主要功能:①細胞表面表達介質(ICAM-1和VCAM-1)參與血管壁炎癥反應;②是多數重要動脈疾病的靶細胞。肺血管平滑肌細胞與主要病生理變化:①平滑肌增生易致肺動脈高壓;②先天性肺動脈狹窄;③肺動脈栓塞。血管平滑肌細胞的加速生長潛能是血管疾病進展的關鍵因素,新研究表明血管平滑肌細胞表達的ICAM-1和VCAM-1能促進血管壁的炎癥反應,并且與血管疾病的發展及穩定性有關。
方法簡介:
實驗室分離的大鼠肺微血管平滑肌采用混合膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
實驗室分離的大鼠肺微血管平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
產品名稱 | 產品規格 | 5×105cells/T25細胞培養瓶 | |
組織來源 | 肺 | 產品貨號 | YS-01X8225 |
生長特性 | 貼壁 | 細胞形態 | 成纖維細胞樣 |
培養信息:
培養基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態:成纖維細胞樣
傳代特性:可傳2-3代左右
消化液:0.25%
培養條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠肺微血管平滑肌體外培養周期有限;建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養,以此保證該細胞的佳培養狀態。
細胞復蘇步驟:
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
公司正在出售的產品:
大鼠糖原0酸化酶M(PYGM)試劑盒 ,英文名: PYGM ELISA Kit
Mouse placea growth factor (PLGF) ELISA Kit 小鼠胎盤生長因子(PLGF)試劑盒
Rat17-Hydroxyprogesterone,17-OHPELISAKit 大鼠17羥孕酮(17-OHP)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforH-4(umanNeuroophin4)ELISAKIT人神經營養因子4
細胞PKCδ激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKi-proBNP大鼠N端前腦素
小鼠角化細胞內分泌因子(KAF)/雙調蛋白(AR)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠活化素A(ACV-A)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠腦源性神經營養因子(BDNF)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠骨成型蛋白2(BMP-2)ELISAKit ELISA. 96T/48T
嗅覺受體家族5亞基3抗體
小鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)ELISA 試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
Rat desmin (Des) ELISA Kit 大鼠結蛋白(Des)試劑盒
Humancardiacisoformofopni,cELISAKit 人心肌特異性肌鈣蛋白T(c)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanadenosinedeaminase,ADA試劑盒人腺苷脫氨酶(ADA)試劑盒規格:96T/48T
直腸標記K-ras糞便檢測突變熒光分析試劑盒50次
Mousealpha-granularmembraneprotein,GMP-140ELISAKit小鼠血漿α顆粒膜蛋白(GMP-140)試劑盒規格:96T/48T
N-α-乙酰轉移酶40抗體
FCGR2B重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 Protein
MT-II(Melanotan II Acetate 1gMT-II(Melanotan II Acetate) 醋酸美拉諾坦II
IL9重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein
CYGB Protein Human 重組人 Cytoglobin / CYGB 蛋白
AKT3 Protein Mouse 重組小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 標簽)
大鼠肺微血管平滑肌細胞MT-II(Melanotan II Acetate 1gMT-II(Melanotan II Acetate) 醋酸美拉諾坦II
CYGB Protein Human 重組人 Cytoglobin / CYGB 蛋白
FCGR2B重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白 Protein
AKT3 Protein Mouse 重組小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 標簽)
IL9重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白 Protein
細胞凍存步驟:
待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例;
1.細胞凍存時,棄去培養基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養基終止消化,可使用血球計數板計數。
2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。
3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。