人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)ELISA試劑盒實驗ELISA結果判定常用的幾種方法：
1)目測定性法：加入底物經酶解和終止反應后，肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照；與陰性對照的顏色接近者，判定為陰性。
2)以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2～3SD，作為陽性結果的閾值。
3)以P／N值(陽性孔OD值／陰性孔OD值)大于或等于2．1為陽性；P／N值小于2．1，但大于1．5為可疑；P／N小于1．5為陰性。
4)定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
我們將在人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)ELISA試劑盒操作中各個環(huán)節(jié)常出現問題的原因及解決辦法總結于下，以期給客戶帶來一些啟發(fā)，提高試驗質量。
51160 MID2/RNF60/Midline-2 環(huán)指蛋白60抗體 0.2ml
51161 RP1/DCDC4A 視網膜色素變性蛋白1抗體 0.2ml
51162 STAU2 雙鏈RNA結合蛋白Staufen2抗體 0.2ml
51163 Gliomedin/COLM 神經膠質蛋白(肝癌相關基因2)抗體 0.2ml
51164 KIF1B 驅動蛋白家族成員1B抗體 0.2ml
51165 MYBPC1 肌球蛋白結合蛋白C抗體 0.2ml
51166 Neurexin 1 軸突蛋白1(Neurexin 1α)抗體 0.2ml
51167 TANC1 TANC1蛋白抗體 0.2ml
51168 MYRIP/SLAC2-C MYRIP蛋白抗體 0.2ml
51169 Amisyn 突觸融合結合蛋白6抗體 0.2ml
51170 Bestrophin 卵黃狀黃斑病蛋白抗體 0.2ml
51171 Bestrophin 2 卵黃狀黃斑病蛋白2抗體 0.2ml
51172 Bestrophin 3 卵黃狀黃斑病蛋白3抗體 0.2ml
51173 Bestrophin 4 卵黃狀黃斑病蛋白4抗體 0.2ml
51174 C1QL1 補體組分1q子成分樣蛋白1抗體 0.2ml
51175 CHL1/CALL 神經細胞粘附分子CALL抗體 0.2ml
51176 COL6A5/Collagen VI alpha 5 6型膠原蛋白α5抗體 0.2ml
51177 CPA6 胰羧肽酶A6抗體 0.2ml
51178 GJC2/Connexin 47 間隙連接蛋白47抗體 0.2ml
51179 Sin3b 轉錄抑制蛋白Sin3b抗體 0.2ml
51180 HAPLN2 透明質酸及粘蛋白2抗體 0.2ml
51181 HAS3 透明質酸合成酶3抗體 0.2ml
51182 KAL1 卡爾曼綜合征基因1抗體 0.2ml
51183 Keratocan 細胞角膜蛋白多糖抗體 0.2ml
51184 Laminin alpha 4 層粘蛋白α4抗體(Lamininα4) 0.2ml
51185 Laminin alpha 4 層粘蛋白α4抗體(Lamininα4) 0.2ml
51186 Ligamentum Nuchae Elastin 項韌帶彈性蛋白抗體 0.2ml
51187 APBA3/Mint3/X11gamma β淀粉樣前體蛋白結合蛋白3抗體 0.2ml
51188 NTN3/Netrin-3 軸突生長誘導因子3抗體 0.2ml
51189 Sphingomyelin Synthase 1 鞘磷脂合成酶1抗體 0.2ml
51190 OTOA/DFNB22 耳聾、常染色體隱性遺傳22抗體 0.2ml
51191 OLFM3/Optimedin 嗅球蛋白3抗體 0.2ml
51192 SMS2/Sphingomyelin Synthase 2 鞘磷脂合成酶2抗體 0.2ml
51193 PSCDBP/CYTIP 胞粘蛋白結合調節(jié)蛋白抗體 0.2ml
51194 Plakophilin 2 橋粒斑菲素蛋白2抗體 0.2ml
51195 SPON2/M spondin/Mindin 細胞外基質底物反應蛋白2抗體 0.2ml
51196 SNTG2/Syntrophin 5 肌蛋白結合蛋白γ2抗體 0.2ml
51197 DOK6 胞漿接頭蛋白Dok6抗體 0.2ml
51198 TECTB 遺傳性耳聾β-tectorin抗體 0.2ml
51199 TNR/Tenascin-R 腱糖蛋白R抗體 0.2ml
51200 procollagen type IIA Ⅱ型膠原α1抗體 0.2ml
51201 AMIGO1 粘附分子IgG樣結構域蛋白1抗體 0.2ml
51202 ANTXR2 炭疽毒素受體2抗體 0.2ml
51203 ASTN2 星形肌動蛋白抗體 0.2ml
51204 CDH18 鈣粘附分子18抗體 0.2ml
51205 CNTN4/AXCAM 軸突相關粘附分子抗體 0.2ml
51206 CNTNAP3 接觸蛋白相關蛋白3抗體 0.2ml
51207 CNTNAP4 接觸蛋白相關蛋白4抗體 0.2ml
51208 Cadherin 8 鈣粘附蛋白8抗體 0.2ml
51209 Cadherin 8 鈣粘附蛋白8抗體 0.2ml
51210 Cadherin 9 人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)ELISA試劑盒鈣粘附蛋白9抗體 0.2ml
51211 MPZL2/EVA1 髓鞘蛋白P0樣蛋白2抗體 0.2ml
51212 HDL/high density lipoprotein 高密度脂蛋白抗體 0.1ml
51213 ARSB 芳基硫酸酯酶B抗體 0.2ml
51214 CDHF15/FAT3 鈣粘蛋白15抗體 0.2ml
下面我們分析Elisa試驗操作中可能影響結果的原因，并給出相應的解決辦法：
1 選擇試劑：選擇質量優(yōu)良的檢測試劑，嚴格按照試劑說明書進行操作，操作前將試劑在室溫下平衡30-60分鐘。
2 加樣：可能原因：
1）血清或血漿標本分離不好即進行加樣；
2）手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時間過長(特別是室內溫度較高時)； 3）加完標本再加酶試劑時酶濺出孔外。
解決辦法：
1） 標本為血清：將血液先自然存放1-2小時后，再用3000rmp離心15分鐘；標本為血漿：必須使用含抗凝劑的血液標本收集管，采血后必須立即顛倒*混合5-10次，放置一段時間后，3000rpm離心15分鐘；若在幾天內檢測，可放在2-8℃冰箱中，若要貯存，則置于-20℃的低溫冰箱內。
2) 加樣后及時放入孵箱。
3) 加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
4) 如果采用AT或其他全自動加樣，選擇FAME或其他后處理儀器加酶試劑。
5) 標本較多時，請分批操作。
3 孵育：可能原因：
1) 孵育時未貼封片或加蓋，使標本或稀釋液蒸發(fā)，吸附于孔壁，難于清洗*；
2) 孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗*。解決辦法：
1) 貼封片或加蓋；
2) 按說明步驟嚴格控制操作時間。
4 洗板：可能原因：
1) 采用手工洗板,孔與孔之間液體交叉。
2) 采用半自動洗板機洗板時，洗液量不足，導致洗板不*；洗板針堵塞，抽吸不*；洗板不暢，導致洗板效果差。
3) 反應板過多造成洗板等待時間長。 解決辦法：
1) 保證洗液注滿各孔，洗板針暢通，洗完板后在吸水紙（選擇干凈、無或少塵的吸水材料）上輕輕拍干；
2) 合理安排，或多用幾臺洗板機。
5人小扁豆素結合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質體1(AFP-L1)ELISA試劑盒顯色：可能原因：
1) 顯色劑配制后放置時間過長或使用過期顯色劑；
2) 加顯色劑時濺出孔外造成液體回流。解決辦法：
1) 顯色劑盡量在臨用前配制，堅持不用過期顯色劑，肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用； 2) 加樣時保持顯色劑不外流；
3) A、B液應避免接觸金屬器械。
6 終止：可能原因如加終止液時產生較多氣泡，導致假陽性增加。所以在加終止液時應避免產生氣泡。
7 讀板：如讀板時板底不清潔等。應保證酶標板清潔。
所以在整個操作過程中保證酶標板不接觸次氯酸; 盡可能實現ELISA檢測標準自動化，有效提高檢測質量。
在實際操作中，除了選擇優(yōu)良試劑外，必須嚴格按照操作步驟進行操作，同時作好室內質控、室間質評，以嚴謹的工作作風檢測每一份標本，才能保證檢測質量。現在國內已有相當數量的單位擁有全自動酶標儀，這對于實現ELISA標準化檢測、提高檢測質量起到了重要作用。
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