HSVⅠAb人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體ELISA試劑盒
TNF-α山羊腫瘤壞死因子αELISA檢測 ST1人基質(zhì)裂解素酶聯(lián)免疫
β-EP山羊β內(nèi)啡肽ELISA檢測 SS豬生長抑素酶聯(lián)免疫
acetone山羊酮檢測ELISA檢測 SS小鼠生長抑素酶聯(lián)免疫
IGFBP-3鹿胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白3ELISA檢測 SS人生長抑素酶聯(lián)免疫
eNOS鹿內(nèi)皮型一氧化氮合成酶ELISA檢測 SS大鼠生長抑素酶聯(lián)免疫
ASAA鹿血清淀粉樣蛋白ELISA檢測 ssDNA小鼠抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體酶聯(lián)免疫
EMP鹿紅細胞膜蛋白ELISA檢測 ssDNA人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體酶聯(lián)免疫
HSVⅠAb人單純皰疹病毒Ⅰ型抗體ELISA試劑盒途:
用GsaR人促胃液素受體ELISA試劑盒 的含量。
DHT雙氫睪酮ELISA檢測 SR人促胰液素/分泌素受體酶聯(lián)免疫
NF-κB p65兔核因子κB亞基p65親和肽ELISA檢測 SRP人抗信號識別顆粒抗體酶聯(lián)免疫
G-CSF兔粒細胞集落刺激因子ELISA檢測 SRB/CD36人清道夫受體B酶聯(lián)免疫
ASAA兔血清淀粉樣蛋白ELISA檢測 sRANKL小鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基酶聯(lián)免疫
Hpt/HP兔結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白ELISA檢測 sRANKL人可溶性核因子κB受體活化因子配基酶聯(lián)免疫
2-AP兔子α2抗纖溶酶αELISA檢測 sRANKL大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基酶聯(lián)免疫
Plg兔子纖溶酶原ELISA檢測 SP小鼠P物質(zhì)酶聯(lián)免疫
BMPs兔骨形成蛋白ELISA檢測 SP兔p物質(zhì)酶聯(lián)免疫
OPG兔骨保護素ELISA檢測 SP大鼠P物質(zhì)酶聯(lián)免疫
Amylin兔胰淀素ELISA檢測 sP-Selectin豬可溶性P選擇素酶聯(lián)免疫
步驟一
雙抗體夾心法
1.包被:用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1~10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內(nèi)溶液,用洗滌緩沖液洗3次,每次3分鐘。(簡稱洗滌,下同)。
2. 加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌。(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3. 加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經(jīng)滴定后的稀釋度)0.1ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4. 加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5. 終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml。
6. 結(jié)果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結(jié)果:反應孔內(nèi)顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或極淺,依據(jù)所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
ELISA的基礎(chǔ)是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結(jié)合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質(zhì)分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結(jié)合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質(zhì)的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產(chǎn)物,產(chǎn)物的量與標本中受檢物質(zhì)的量直接相關(guān),故可根據(jù)呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結(jié)果,使測定方法達到很高的敏感度。 ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。
然而,影響Elisa試驗結(jié)果的因素很多,故加強各個環(huán)節(jié)的質(zhì)量保證才能充分發(fā)揮其方法學的優(yōu)點。