人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,HCAEC細(xì)胞基本特性

細(xì)胞生長(zhǎng)：貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)：上皮樣；多角形　

細(xì)胞數(shù)量：1×106個(gè)細(xì)胞數(shù)

細(xì)胞傳代：1:2傳代

人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,HCAEC細(xì)胞的原位染色

(1)貼壁生長(zhǎng)的對(duì)數(shù)期細(xì)胞鋪在24孔或6孔板中（內(nèi)有潔凈蓋玻片），讓其爬片生長(zhǎng)，待長(zhǎng)到50%~80%滿時(shí)，凋亡誘導(dǎo)劑處理細(xì)胞。

(2)將不同時(shí)間點(diǎn)處理的細(xì)胞進(jìn)行免疫熒光染色，染色步驟同上。

(3)將染色的爬片細(xì)胞放于一張滴有少量甘油（5ml）的載玻片上，熒光顯微鏡或共聚焦激光掃描顯微鏡觀察TFAR19在細(xì)胞中的定位。

臨床病理切片的染色、檢測(cè)。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)、檢測(cè)。

分析TFAR19蛋白在人體內(nèi)各組織器官的分布及定位

透射電子顯微鏡觀察

　　結(jié)果評(píng)判：凋亡細(xì)胞體積變小，細(xì)胞質(zhì)濃縮。凋亡Ⅰ期（pro-apoptosis nuclei）的細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)高度盤繞，出現(xiàn)許多稱為氣穴現(xiàn)象（cavitations）的空泡結(jié)構(gòu)；Ⅱa期細(xì)胞核的染色質(zhì)高度凝聚、邊緣化；細(xì)胞凋亡的晚期，細(xì)胞核裂解為碎塊，產(chǎn)生凋亡小體。

DNA片斷化檢測(cè)

　　細(xì)胞凋亡時(shí)主要的生化特征是其染色質(zhì)發(fā)生濃縮, 染色質(zhì)DNA在核小體單位之間的連接處斷裂, 形成50~300kbp長(zhǎng)的DNA大片段, 或180~200bp整數(shù)倍的寡核苷酸片段, 在凝膠電泳上表現(xiàn)為梯形電泳圖譜(DNA ladder)。人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,HCAEC細(xì)胞經(jīng)處理后，采用常規(guī)方法分離提純DNA，進(jìn)行瓊脂糖凝膠和溴化乙啶染色，在凋亡細(xì)胞群中可觀察到典型的DNA ladder。如果細(xì)胞量很少，還可在分離提純DNA后，用32P-ATP和脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）使DNA標(biāo)記，然后進(jìn)行電泳和放射自顯影，觀察凋亡細(xì)胞中DNA ladder的形成。

大分子染色體DNA片段的測(cè)定

細(xì)胞凋亡的早期,染色體斷裂成為50~300kbp長(zhǎng)的DNA大片段。所有超過(guò)一定分子量大小的雙鏈DNA分子在瓊脂糖凝膠中的遷移速度相同。線性DNA的雙螺旋半徑超過(guò)凝膠半徑時(shí)，即達(dá)到分辨力的極限。此時(shí)凝膠不再按分子量的大小來(lái)篩分DNA，DNA像通過(guò)彎管一樣，以其一端指向電場(chǎng)一極而通過(guò)凝膠，這種遷移模式稱之為"爬行"。因此，細(xì)胞凋亡早期產(chǎn)生的50~300kbp長(zhǎng)的DNA大片段不能用普通的瓊脂糖凝膠電泳來(lái)分離。通常采用脈沖電泳技術(shù)可圓滿地解決這一問(wèn)題。這個(gè)方法是在凝膠上外加正交的交變脈沖電場(chǎng)。每當(dāng)電場(chǎng)方向改變后，大的DNA分子便滯流在爬行管中，直至新的電場(chǎng)軸向重新定向后，才能繼續(xù)向前移動(dòng)。DNA分子量越大，這種重排所需要的時(shí)間就越長(zhǎng)。當(dāng)DNA分子變換方向的時(shí)間小于電脈沖周期時(shí)，DNA就可以按其分子量大小分開(kāi)。

人冠狀動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞,HCAEC細(xì)胞相關(guān)產(chǎn)品如下：MPC-83    胰腺腺泡癌細(xì)胞
C3    白血病細(xì)胞
RIN-m5F    β胰島素瘤
L1210    淋巴白血病細(xì)胞
MA891    乳腺癌細(xì)胞
TA2    自發(fā)高乳腺癌細(xì)胞
SP2/0    骨髓瘤細(xì)胞
U14    宮頸癌細(xì)胞
YAC-1    淋巴瘤細(xì)胞
G422    神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞
TC-1    HPV16，E6,E7和ras基因共轉(zhuǎn)化的C57BL/C(H-2b)小鼠肺上皮細(xì)胞
SRA01/04    人晶體上皮細(xì)胞系
MCF-7    乳腺腺癌細(xì)胞
CNE-1    高分化鼻咽癌細(xì)胞
MEF-7/Adr    乳腺腺癌*耐藥株
KB    口腔表皮樣癌細(xì)胞
SK-BR-3    乳腺腺癌細(xì)胞
Hep-2    喉癌細(xì)胞
A2780    卵巢癌細(xì)胞
Ec109    食管癌細(xì)胞
Coc2    卵巢癌細(xì)胞
MGC-803    胃腺癌細(xì)胞
OVCAR-3    卵巢癌細(xì)胞
SGC7901    胃低分代腺癌細(xì)胞
SK-OV-3    卵巢癌細(xì)胞
HuTu-80    十二指腸腺癌細(xì)胞
SKOV-3/DDP    卵巢癌*耐藥株
Caco-2    結(jié)腸癌細(xì)胞
HeLa    宮頸癌細(xì)胞
CoLo205    結(jié)腸癌細(xì)胞