人牙周膜成纖維細胞特性：該細胞是Fogh J和TrempeG分離和鑒定的眾多人類腫瘤細胞系中的一種；

細胞純度：93％

細胞活力：87％（Viability by Trypan Blue Exclusion）

細胞檢測：細胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌

保存及應用

如是新鮮原代細胞，請于收到后放入CO2培養箱內靜置2-3h后再進行實驗操作；如是凍存細胞，收到后可放入液氮或-80℃冰箱保存也可進行復蘇操作。

人牙周膜成纖維細胞操作步驟

1用包被Buffer稀釋的重組人TFAR19（1mg/ml）包被ELISA板, 100ml/well, 37°C孵育2h或4°C過夜（一般24h以上）。

2洗滌Buffer洗板三次，加入封閉液，200 ml/well ， 37°C孵育2h或4°C過夜。

3洗滌Buffer洗板三次，加入不同稀釋度的病人血清（3個重復孔）100ml/well ，37°C孵育1h。設包被Buffer、洗滌Buffer 、封閉液為陰性對照。

4洗滌Buffer洗板三次，加入1：2500稀釋的HRP標記的抗人IgG, 100ml/well，37°C孵育1h。

5洗滌Buffer洗板三次，加入顯色液，100 ml/well，避光反應10~15min。

6加入H2SO4終止反應，50 ml/well。

7ELISA Reader 讀取OD490 光密度值，分析和比較病人血清和正常血 清中TFAR19自身抗體的表達水平。

潛伏期特點：

長短與細胞接種密度、種類、使用的培養基性質有關。

(1)細胞貼附后進入潛伏期,細胞無增殖。少見分裂相，細胞有運動活動。

(2)初代培養 細胞潛伏期約為24～96小時或更長，

連續細胞系和腫瘤細胞潛伏期約6～24小時。

(3)細胞接種密度大潛伏期短。

(4)細胞出現分裂相增多時，標志細胞進入指數增生期。

指數增生期(logarithmic growth phase)：

特點：細胞增殖zui旺盛階段,分裂相增多。

細胞分裂指數(mitotie index MI) ：

表示每1000個細胞中的分裂相數。

條件：分裂相數與細胞種類、培養成分、pH培養箱溫度有關。

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