一、實驗目的 
掌握植物細胞骨架的光鏡標本制作方法。
細胞骨架是指細胞質中縱橫交錯的纖維網絡結構，按組成成分和形態結構的不同可分為微管、微絲和中間纖維。它們對細胞形態的維持、細胞的生長、運動、分裂、分化和物質運輸等起重要作用。光學顯微鏡下細胞骨架的形態學觀察多用1% Triton X-100處理細胞，可使細胞膜溶解，而細胞骨架系統的蛋白質被保存， 再用考馬斯亮蘭R250染色，使得胞質中細胞骨架得以清晰顯現。

二、材料、試劑和儀器
1． 材料 
新鮮洋蔥鱗莖、人口腔上皮細胞
2． 試劑
1） M緩沖液（pH 7.2）各成分終濃度為：
50mmol/L咪唑(MW:68.08), 
50mmol/L KCl(MW:74.55), 
0.5mmol/L MgCl2?6H2O(MW:203.30), 
1mmol/L EGTA(MW:380.36), 
0.1mmol/L EDTA-Na2(MW:372.24),
1mmol/L DTT(MW:154.3)
2） 6mmol/L PBS磷酸緩沖液 （pH 6.5）: 
KH2PO4 : Na2HPO4?2H2O = 7:3 (見附錄3 查磷酸緩沖液的配置)
3） 0.7% NaCl生理鹽水
4） 1% Triton X-100(聚乙二醇辛基苯基醚) 溶于 M-緩沖液
5） 3% 戊二醛100mL: 25% 戊二醛取12mL ,PBS 88mL 
6） 0.2% 考馬斯亮藍R250染液 200mL: 
考馬斯亮藍R250 0.2g, 
甲醇 46.5mL, 
冰乙酸 7mL, 
蒸餾水46.5 mL
3．儀器 
光學顯微鏡，鑷子，剪刀，試管，表面皿，滴管，載玻片，蓋玻片,滅菌牙簽，1.5mL離心管，1mL吸頭，1mL取液器，酒精燈，染色缸

細胞骨架動畫

三、實驗程序 
細胞骨架的光學顯微鏡觀察 

四、結果與分析
洋蔥鱗莖外層與內層的表皮細胞比較（放大倍數10×20）
細胞骨架的光學顯微鏡觀察 

五、思考題
1．光鏡下觀察到的細胞骨架有何形態特征？
2．請設計一個實驗鑒定你所觀察到的細胞骨架是哪一類型。