人阿米巴原蟲抗原(Amebiasis Ag)Elisa試劑盒實驗原理
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中人阿米巴原蟲抗原(Amebiasis Ag)表達。用純化的抗
體包被微孔板，制成固相抗體，可與樣品中阿米巴原蟲抗原(Amebiasis Ag)相結合，經洗滌
除去未結合的抗原和其他成分后再與 HRP 標記的抗體結合，形成抗體-抗原-酶標抗體復合
物，經過*洗滌后加底物 TMB 顯色。TMB 在 HRP 酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作
用下轉化成zui終的黃色。用酶標儀在 450nm 波長下測定吸光度（OD 值），與 CUTOFF 值相
比較，從而判定標本中人阿米巴原蟲抗原(Amebiasis Ag)的存在與否
人阿米巴原蟲抗原(Amebiasis Ag)Elisa試劑盒操作步驟
1.
編號：將樣品對應微孔按序編號，每板應設陰性對照 2 孔、陽性對照 2 孔、空白對照 1
孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）
2.
加樣：分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50µl。然后在待測樣品孔先
加樣品稀釋液 40µl，然后再加待測樣品 10µl。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不
觸及孔壁，輕輕晃動混勻，
3.
溫育：用封板膜封板后置 37℃溫育 30 分鐘。
4.
配液：將 30 倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30 倍稀釋后備用
5.
洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置 30 秒后棄去，如此
重復 5 次，拍干。
6.
加酶：每孔加入酶標試劑 50µl，空白孔除外。
7.
溫育：操作同 3。
8.
洗滌：操作同 5。
9.
顯色：每孔先加入顯色劑 A50µl，再加入顯色劑 B50µl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色
10 分鐘.
10. 終止：每孔加終止液 50µl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。
11. 測定：以空白空調零，450nm 波長依序測量各孔的吸光度（OD 值）。 測定應在加終止
液后 15 分鐘以內進行。
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