細胞：FRhK-4細胞
中文名稱：恒河猴胚腎細胞
生長特性：貼壁細胞
培養基：1640 培養基 血清：10%FBS（GIBCO胎牛血清）
凍存條件：50%基礎培養基、40% FBS、10% DMSO
細胞常規培養傳代流程（ 請嚴格遵照無菌操作）
1． 吸出原培養瓶中的培養基，PBS 緩沖液潤洗細胞兩次，加 2-3 ml 0.25% 胰_酶進行消化細胞（注意把握消化時間，通常控制在 1-2min）
2． 鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（不建議消化到細胞漂浮）去掉胰_酶，加 6~8ml 培養基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落，吹散。
3． 取部分細胞懸液轉移到新的培養皿/瓶中，添加適當的培養基，把細胞懸液打勻，于培養箱中培養。
4． 注意培養基 PH 值變化情況，定期換液（每周 2-3 次），待細胞密度達到 80%以后重復 1 項操作或凍存。
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角化細胞轉錄揭示細胞分化及功能
鑒別加速成長的和衰老的角化細胞的轉錄有助于揭示細胞的分化、干擾素信號和Notch信號通路。
表皮的角化細胞由增殖細胞轉變成早期和晚期分化層期間，在正常皮膚的角質層凋亡前，經歷了高度的形態學和分子水平上的變化。角質層的形成對于皮膚正常的抵御感染功能至關重要。
在嫩或老的皮膚角化細胞中，轉錄過程監管細胞分化，及保持表皮厚度以抵抗感染的防御機制，但目前對這一過程了解甚少。
進一步說，因為在皮膚表面，細胞的最終分化是其復制頂點不可逆損失的一個特征，這個過程可以看作是衰老的一種形式。
但是目前一個完整的衰老角化細胞的轉錄圖象尚不能勾勒出分化和衰老的界限。為填補這項空白，我們利用試管中球形角化細胞轉錄分析儀來培養增殖細胞，早期和晚期流式細胞或正經歷復制性衰老的角化細胞。
球形基因表達圖譜表明早期流式角化細胞同增殖細胞有些類似，而同晚期細胞差別很大，同樣與復制性衰老細胞存在顯著差異。流式角化細胞和復制性衰老細胞有一些相同的監管分化的基因，而后者在干擾素信號和炎癥通路上的基因表達水平更高。
這些結果為研究復制性衰老和部分基因參與分化的角化細胞的自我轉錄程序提供了新的見解。此外，角化細胞衰老的監控機制可能包括干擾素信號通路的參與，而該通路體現了細胞保護皮膚免受感染的重要作用。
