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細胞生存條件與細胞查詢

時間:2013/10/29閱讀:1288
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 細胞生存條件與細胞查詢

  

  1.基本營養物質

  (1)糖

  六碳糖主要能源、維持滲透壓,含葡萄糖1-5%。

  (2)氨基酸

  維持生存需12種氨基酸(精、胱、亮、異亮、賴、蛋、苯丙、蘇、色、組、酪、纈)。谷氨酰胺需量zui大,缺乏時細胞生長不良。

  單細胞培養或細胞量少時,所需氨基酸的種類和量增多,細胞主要利用左旋氨基酸異構體。

  (3)維生素

  細胞大部分需水溶性B族維生素,Vitc不可少,1-10mg/100ml可促進正常細胞生長繁殖。

  2.促生長因子、激素類物質

  3.其它物質

  基本元素、微量元素、促細胞貼附物質(纖粘連蛋白、層粘連蛋白laminin、IV型膠原、氨基多糖類)

  4.水

  主要成分和生存環境,要求高純度水。

  5.溫度

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  細胞庫細胞表查詢

  細胞生存條件與細胞查詢 

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  細胞生存條件與細胞查詢 

  哺乳動物及人源細胞zui適培養溫度為35℃—37℃,對低溫耐受力比高溫強。39℃以上受損→死亡;不低于0℃時(0℃-34℃),細胞能生存,但代謝降低、分裂延緩。

  6.氣體環境和pH

  需O2、CO2,通氧量過大對細胞有毒害。

  CO2主要與維持pH有關,細胞培養*pH為7.2—7.4,通過緩沖系統和調節CO2含量,維持正常pH。

  開放培養要求5%CO2環境、HEPES(羥乙基哌嗪乙硫磺酸)10—50mmol/ml可防止pH變化。

  含Earle’s緩沖系統的培養基適合于5%CO2的培養條件,Hanks’緩沖系統的培養基僅含有0.35g/LNaHCO3,不能用于5%CO2的環境,若放入CO2培養箱,溶液將迅速變酸,使用時應注意。

  7.濕度和光

  開放培養相對濕度控制在95%。細胞培養需避光,紫外線或可見光可造成核黃素、酪氨酸、色氨酸等產生有毒的光產物,抑制細胞生長,降低其貼壁能力。

  8.影響細胞生長的其它因素

  接觸橡膠用品、收集細胞時離心速度過大、細胞接種濃度過低等。

  

  哺乳動物及人源細胞zui適培養溫度為35℃—37℃,對低溫耐受力比高溫強。39℃以上受損→死亡;不低于0℃時(0℃-34℃),細胞能生存,但代謝降低、分裂延緩。

  6.氣體環境和pH

  需O2、CO2,通氧量過大對細胞有毒害。

  CO2主要與維持pH有關,細胞培養*pH為7.2—7.4,通過緩沖系統和調節CO2含量,維持正常pH。

  開放培養要求5%CO2環境、HEPES(羥乙基哌嗪乙硫磺酸)10—50mmol/ml可防止pH變化。

  含Earle’s緩沖系統的培養基適合于5%CO2的培養條件,Hanks’緩沖系統的培養基僅含有0.35g/LNaHCO3,不能用于5%CO2的環境,若放入CO2培養箱,溶液將迅速變酸,使用時應注意。

  7.濕度和光

  開放培養相對濕度控制在95%。細胞培養需避光,紫外線或可見光可造成核黃素、酪氨酸、色氨酸等產生有毒的光產物,抑制細胞生長,降低其貼壁能力。

  8.影響細胞生長的其它因素

  接觸橡膠用品、收集細胞時離心速度過大、細胞接種濃度過低等。

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