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大鼠基質細胞衍生因子1βELISA試劑盒操作步驟

閱讀:483發布時間:2014-7-4

大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒    Rat Stromal cell derived factor 1β,SDF-1β ELISA Kit    ,規格:96T/48T,產品別名:    大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)檢測試劑盒 
大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒原理的簡要說明書:基質細胞衍生因子-1(SDF-1)又稱趨化因子CXCL12,是小分子的細胞因子,屬于趨化因子蛋白家族。它有兩種形式, SDF-1α/CXCL12a和SDF-1β/CXCL12b。趨化因子有四個保守的半*殘基形成兩對雙硫鍵以構成趨化因子的特殊結構。*第二半*殘基之間隔著一個介入氨基酸殘基。            
大鼠基質細胞衍生因子1β(SDF-1β/CXCL12)ELISA試劑盒操作步驟
1.使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
2.根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
3.加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
4.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
5.每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
6.甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
7.每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
8.取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
9.在450nm波長處測定各孔的OD值。

 


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