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植物ELISA試劑盒實驗原理

閱讀:135發布時間:2015-01-19

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詳細介紹:    
植物ELISA試劑盒實驗原理:

本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中(產品名稱)水平。用純化的其抗體包被微孔板,制成固相抗體。往包被單抗的微孔中依次加入本產品,再與HRP標記的其抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中產品的濃度。

ppar elisa試劑盒組成:

1、30倍濃縮洗滌液20ml×1瓶7 終止液 6ml×1瓶

2、酶標試劑 6ml×1瓶8 標準品(240ng/L) 0.5ml×1瓶

3、酶標包被板 12孔×8條9 標準品稀釋液 1.5ml×1瓶

4、樣品稀釋液 6ml×1瓶10 說明書 1份

5、顯色劑A液 6ml×1瓶11 封板膜 2張

6、顯色劑B液 6ml×1/瓶12 密封袋 1個

ppar elisa試劑盒標本要求:

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融

2.不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟:

1.標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。

120ng/L5號標準品 150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

60ng/L 4號標準品 150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

30ng/L 3號標準品 150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

15ng/L 2號標準品 150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

7.5ng/L1號標準品 150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2.加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。

操作程序總結:

1.準備試劑,樣品和標準品

2.加入準備好的樣品和標準品,37℃反應30分鐘

3.洗板5次,加入酶標試劑,37℃反應30分鐘

4.洗板5次,加入顯色液A、B,37℃反應10分鐘

5.加入終止液

6.15分鐘之內度OD值

7.計算


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