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上海邦景實業有限公司
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閱讀:649發布時間:2014-4-9
病毒或毒素與相應的抗體結合后,失去對易感動物的致病力,謂之中和試驗。試驗方法主要有簡單定性試驗、固定血清稀釋病毒法、固定病毒稀釋血清法、空斑減少法等。由于病毒中和實驗操作煩瑣,耗時費料,臨床上幾乎不用,但作為經典方法在病毒鑒定中起著重要的作用,許多新的檢測方法都要以之為標準來進行比較。
以中和實驗來鑒定或滴定流感病毒時,常用雞胚或組織培養細胞,操作方法與其他病毒(如NDV)的中和實驗相同。
一般常用固定病毒稀釋血清法,IOOEIDs或1000TCID5的AIV與RED處理過的倍比稀釋的血清等量混合,室溫lh,每個雞胚或每瓶細胞接種0.2ml,每個稀釋度接種4個胚或細胞瓶,37℃孵育72h至7天,檢查雞胚尿囊液的血凝活性或細胞培養物的血細胞吸附作用,按標準方法算出中和效價,不出現血凝活性或血細胞吸附作用的zui高稀釋度即為血清中和抗體滴定。
VNT實驗是zui敏感而特異的血清學方法,只有抗體與病毒顆粒上的表面抗原相對應、特別是與吸附到宿主細胞上的病毒表面抗原相對應時,才能在實驗中取得滿意的顯示效果。因此,某一個血清型的中和實驗抗體只與同組內地其他病原表現出有限的交叉反應。
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