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上海邦景實業有限公司
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閱讀:403發布時間:2014-12-3
將可溶性抗原吸附于一種與免疫無關的顆粒載體上,然后與相應的抗體結合,也可出現顆粒載體的凝集現象,稱為間接凝集反應。間接凝集反應比直接凝集反應敏感性為高,可用于微量抗體或抗原的檢查。本實驗介紹了間接凝集反應兩種主要方法:間接血球凝集試驗、間接凝集抑制試驗和協同凝集試驗。
實驗原理
1. 間接血球凝集試驗是根據紅血球表面的吸附作用而建立起來的。將細菌可溶性抗原提出使之吸附于紅血球表面,此時紅血球即稱為“致敏紅血球”。這種致敏的紅血球具有細菌的抗原性,與相應的抗血清相遇可產生凝集現象。
間接血凝抗原的制備可用加堿或加熱的方法使菌體中的多糖物質浸出,去除類脂以免干擾紅血球的吸附作用。但如系蛋白質時則用來吸附的紅血球需先用鞣酸予以處理。
2. 若使可溶性抗原與相應抗體先混合,充分作用后再加入有關的免疫微球,因抗體已被可溶性抗原結合,不再出現免疫微球的被動凝集現象,叫間接凝集抑制試驗,臨床化驗檢查中常用的免疫妊娠試驗就是一種間接凝集抑制試驗。妊娠試驗:孕婦尿中絨毛膜*的含量比正常尿高。因此當往尿中加入抗絨毛膜*抗體時,由于發生抗原抗體反應的結果,抗體被消耗,此時再往尿中加入膠乳抗原(吸附有人類絨毛膜*的聚苯乙烯乳膠顆粒)。不發生反應,抗原仍呈乳狀液體,即為妊娠試驗陽性。反之,被檢尿中絨毛膜*含量甚少(非妊娠尿)不足以把加入的抗體消耗,當膠乳抗原加入后,抗體便與抗原結合發生反應。出現均勻細小顆粒,妊娠試驗為陰性。
3. *細胞壁成分中的A蛋白能與人及多種哺乳動物(豬、兔、羊、鼠等)血清中IgG類抗體的Fc段結合。IgG的Fe段與SpA結合后,兩個Fab段暴露在葡萄球體表面,仍保持其抗體活性和特異性當其與特異性抗原相遇時,也出現特異凝集現象。在以凝集反應中,*菌體成了IgG抗體的載體,稱為協同凝集反應.本反應也可用于檢測微量抗原。
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