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ELISA試劑盒
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ELISA試劑盒的正確使用法

時間:2016/3/30閱讀:654
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ELISA試劑盒原理和操作步驟并不陌生,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,操作過程中夾雜著洗滌和封閉步驟。然而,即使是平淡無奇的洗滌和封閉,如果操作不合理,也會很大程度上影響實驗的準確度。實驗結束時我們是否能獲得有意義而且準確的信息,這在很大程度上取決于操作結果的正確與否。
ELISA試劑盒使用方法:
1、血清:操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅細胞迅速小心地分離。
2、血漿:EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
3、細胞上清液:1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
4、組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
5、保存:如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。ELISA試劑盒如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
在做ELISA試劑盒實驗時洗滌很重要:
洗滌步驟看似很簡單無聊,其實很重要,因為如果未結合的材料(如非特異結合的抗體或檢測試劑)殘留在微孔板中,就會增加背景噪音。如有必要,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結合反應。如果背景過高,懷疑洗滌不夠,可以嘗試增加洗滌次數。

CTH    胱硫醚γ裂解酶抗體
CFTR    囊性纖維化跨膜轉運調節因子抗體
CKIP-1    酪蛋白激酶2相互作用蛋白1抗體
CD40L    CD40L抗體
Alpha s1 Casein    α-s1酪蛋白抗體
CIDEB    CIDEB抗體
Scavenging Receptor SR-BI    高密度脂蛋白受體/清道夫受體抗體
COPS7A    信號轉導蛋白亞基7A抗體
Survivin    細胞凋亡抑制因子抗體
Clostridium perfringens type D    D型產氣莢膜梭菌抗體
Calcitonin    降鈣素抗體
C20orf14    20號染色體開放閱讀框14抗體
CTGF    結締組織生長因子抗體

ELISA試劑盒

 

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