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在做ElISA檢測試劑盒實驗時注意事項及血清保存的注意事項

時間:2016/9/21閱讀:4179
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在做ElISA檢測試劑盒實驗應注意哪些事項
1、實驗嚴格按照說明書的操作進行,實驗結果判定必須以酶標儀讀數為準。
2、酶標包被板開封后如未用完,應立即裝入密封袋中加干燥劑保存。
3、建議所有的標準品、樣本和空白對照都做雙份檢測,取平均值,以減小實驗誤差。
4、若顯色過淺,可適當延長底物溫育時間。
5、鴨源性核酸PCR-熒光探針試劑盒為避免交叉污染,標準品、樣本和空白對照每加一個就要更換一次吸頭;酶標工作液、樣本稀釋液和底物等公共組分,要懸臂加樣,不得碰到微孔;不得重復使用封板膜。
6、試劑盒保質期內使用,鴨源性核酸PCR-熒光探針試劑盒不同批號的試劑不得混用。
7、底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。
ElISA檢測試劑盒血清保存的注意事項以下幾點:
(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預留一定體積空間,否則易發生污染或玻璃瓶凍裂.
(2)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質凝集而出現沉淀.
(3)熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質量.補體參與反應有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發生化學趨化和活化.
(4)血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點":經過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質量,則應立即停止使用,更換另一批號的血清.
(5)一般提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發現血清有懸浮物,則可將血清加入培養液內一起過濾,切勿直接過濾血清.
CFHL4    補體因子H相關蛋白4抗體
CFHL5    補體因子H相關蛋白5抗體
CG028/C7orf28A    7號染色體開放閱讀框28A抗體
CGBP    CpG結合蛋白抗體
CGGBP1    CGG結合蛋白1抗體
CGK2    cGMP依賴性蛋白激酶2抗體
CGNL1    結蛋白樣蛋白CGNL1抗體
CGREF1    細胞生長調節蛋白CGREF1抗體
CHAD    富含亮氨酸軟骨蛋白抗體
CHADL    軟骨蛋白樣蛋白抗體
CHCHD3    卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD3抗體
CHCHD10    卷曲螺旋結構域蛋白CHCHD10抗體
ElISA檢測試劑盒

 

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