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上海邦景ELISA試劑盒的優點及說明
上海邦景有限公司是一家專注于生物的技術企業,學 ELISA試劑盒等生物科技實驗需求。目前很多客戶因為對品牌的信任度問題,公司仍然是一個非常好的選擇上海邦景LISA試劑盒,是 你*。 通常人們使用雙抗夾心法進行ELISA實驗,雙抗夾心法中抗原被夾在捕獲抗體和檢測抗體之間,這種方法既靈敏又有效,受到了許多研究者的青睞。不過有時候雙抗夾心法并不是*選擇,例如有時候抗原特別小讓兩個大抗體難以附著,又或者抗體只有一個抗體結合位點。在上述情況下,競爭性ELISA就更為適用,這種方法是采用帶標記的純化抗原與樣本中無標記的抗原進行競爭,以結合捕獲抗體。
抗體類型
單克隆抗體和多克隆抗體都能夠用于ELISA,實際上有時候二者結合效果更好。例如,對于雙抗夾心法而言,用多抗進行捕獲而單抗進行檢測有時更有幫助。多抗能夠確保捕獲所有抗原,隨后單抗再特異性檢測擁有特定抗原表位的抗原。
雙抗夾心法ELISA中捕獲抗體與檢測抗體(不論多抗還是單抗)的配對很有講究。我們不希望捕獲抗體與檢測抗體競爭抗原上的同一位點,為此我們就需要確保捕獲抗體和檢測抗體所識別的抗原表位不存在重疊。如果捕獲抗體和檢測抗體之間發生了突,就會對實驗結果產生較大影響。要避免這一問題,我們可以選擇購買 “matched pair”的捕獲/檢測抗體對,這些打包在一起的抗體是商家經過驗證才推薦的好組合,
交叉反應
如果抗體間發生沖突或交叉反應就會影響整個實驗的特異性。其中抗體來源所帶來的兼容性就是交叉反應的一個因素。盡管現在購買源自動物的抗體越來越容易,我們仍有必要確認一下是否會產生交叉反應的問題。在用雙抗夾心法進行ELISA檢測時,檢測用的二抗必須特異性針對檢測一抗,而不能與捕獲抗體起反應。如果檢測用二抗與捕獲抗體結合,實驗特異性就會大打折扣。通常我們選用源自不同宿主的捕獲抗體和檢測一抗,來避免上述問題。與此同時,了解試劑盒中提供的buffer也是有必要的(例如washing buffer和blocking buffer),以免這些buffer含有可能影響抗原抗體相互作用的組分,使檢測結果收到影響。
檢測方式
如今檢測ELISA有許多途徑,我們可以根據自己的偏好進行選擇。一般ELISA檢測的是酶促反應的可溶性產物,抗體上結合有相應的酶(例如通常使用的辣根過氧化物酶HRP),而反應體系中添加有相應的底物(如3,3-二氨基聯苯胺DAB)。這種酶促反應生成具有特征性的
顏色,可以通過分光光度計進行檢測,堿性磷酸酶AP也是一種常用酶。酶可以結合在一抗上,也可以結合在二抗上,還可以使用鏈霉親和素標記的酶與親和素標記的一抗結合。此外ELISA的結果檢測還包括放射性檢測、熒光檢測、化學發光或顯色法檢測等。
以上資料上由上海邦景有限公司提供,本司專業代理經營進口/國產ELISA試劑盒,抗體,培養基,實驗耗材,動物血清,化學試劑,標準品對照品,金標檢測試劑盒,提供ELISA試劑盒代測服務,更多產品詳情請!
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