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我們常說酶聯(lián)ELISA試劑盒實驗中的洗滌非常重要,決定實驗成敗的關(guān)鍵!在ELISA測定的反應(yīng)過程中應(yīng)盡量避免非特異性吸附,應(yīng)把這種非特異性吸附的干擾物質(zhì)洗滌下來。洗滌如不*,如有酶結(jié)合物的非特異性吸附,將使空白值升高。另外,在間接法中如血清標(biāo)本內(nèi)的非特異性IgG吸附在固相上而未被洗凈,也將與酶標(biāo)抗體作用而產(chǎn)生干擾。對于酶聯(lián)免疫試劑盒的洗滌主要有兩大方法,那今天小編就給大家簡單講解下哦。
酶聯(lián)ELISA試劑盒 一、liu水沖洗式
開始用于小珠載體的洗滌,洗滌液僅為蒸餾水甚至可用自來水。洗滌時附接一特殊裝置,使小珠在流水沖擊下不斷地滾動淋洗,持續(xù)沖洗 2分鐘后,吸干液體,再用蒸餾水浸泡2分鐘,吸干即可。浸泡式猶如盆浴,流水沖洗式則好比淋浴,其洗滌效果更為*,且也簡便、快速。已有實驗表明,流水沖洗式同樣也適用于微量滴定板的洗滌。洗滌時設(shè)法加大水流量或加大水壓,讓水流沖擊板孔表面,洗滌效果更佳。
酶聯(lián)ELISA試劑盒 二、浸泡式
1.吸干或甩干孔內(nèi)反應(yīng)液;
2.用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去);
3.浸泡,即將洗滌液注滿板孔,放置1-2分鐘,間歇搖動,浸泡時間不可隨意縮短;
4.吸干孔內(nèi)液體,吸干應(yīng)*,可用水泵或真空泵抽吸,也可甩去液體后在清潔毛巾或吸水紙上拍干;
5.重復(fù)操作c和d,洗滌3-4次(或按說明規(guī)定)。在間接法中如本底較高,可增加洗滌次數(shù)或延長浸泡時間。
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