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上海邦景實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第12年

15000017673

ELISA試劑盒
菌種
國(guó)家細(xì)胞
蛋白
科研抗體
國(guó)家培養(yǎng)基
標(biāo)準(zhǔn)品
生化試劑
ATCC細(xì)胞庫(kù)
elisa檢測(cè)試劑盒
感受態(tài)細(xì)胞
RNA/DNA提取
PCR試劑盒
細(xì)胞
生化檢測(cè)試劑盒
細(xì)胞試劑

大鼠試劑盒檢測(cè)程序方法

時(shí)間:2021/1/28閱讀:640
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大鼠試劑盒檢測(cè)程序:
1.  加樣:每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ,將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2.  洗板:用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次,向?yàn)V紙上印干。
3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4.  洗板:同前。
5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6.  洗板:同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ,置 37   ℃ 暗處反應(yīng)15 分鐘。
8.  每孔加入100ul 終止液混勻。
9.  30分鐘內(nèi)用酶標(biāo)儀在 45 0 nm 處測(cè) 吸光值。

大鼠試劑盒步驟:

1.加樣

  1. 除包被外都需45度加樣

  2.加樣體積要準(zhǔn)確

  3.管底加樣,不能加在管壁上

  4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴  

  1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫 度的水浴箱。

  2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

  3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。

  4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便 不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌  

  1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟,但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

  2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板  

  1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。

  2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì) 量和軟件的算法。

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