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凍存原代細(xì)胞的培養(yǎng)

時(shí)間:2022/7/18閱讀:427
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凍存原代細(xì)胞的培養(yǎng):

 

??1.將一管細(xì)胞從液氮罐中取出,注意保護(hù)手和眼睛。

 

??2.將凍存管快速的放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體*融化。

 

??3.將凍存管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無(wú)菌環(huán)境。

 

??4.70%的酒精沖洗凍存管,然后擦去多余酒精。

 

??5.打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋(注意,由于凍存管有負(fù)壓,開蓋時(shí)可能會(huì)有少量溢出,這是正常現(xiàn)象)

 

??6.用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶。多數(shù)細(xì)胞推薦的接種密度為每平方厘米5000個(gè)細(xì)胞。

 

??7.蓋好培養(yǎng)瓶的蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細(xì)胞分布均勻。若需要?dú)怏w交換可打開蓋子。

 

??8.將培養(yǎng)瓶放入培養(yǎng)箱中。

 

??9.放入培養(yǎng)箱后第6-16小時(shí)更換一次培養(yǎng)基,以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細(xì)胞。


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