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ELISA常用方法優勢劣勢對比

時間:2016-8-25閱讀:619
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我們知道,ELISA試劑盒可分為多種類型測定,是一種廣泛應用在測定液體樣本中的蛋白、抗體、或激素的免疫分析技術。 我公司技術部將各種ELISA常用方法的優勢劣勢進行對比,結果如下:

一、直接法:將抗原直接固定在固相載體上,加入酶標記的一級抗體,即可測定抗原總量,此一級抗體的特異性非常重要。

優勢:操作手續簡短,因無須使用二抗可避免交互反應。

劣勢:試驗中的一抗都得用酶標記,但不是每種抗體都適合做標記,費用相對提高。

二、間接法:此測定方法與直接法類似,差別在于一級抗體沒有酶標記,改用酶標記的二級抗體去辨識一級抗體來測定抗原量。

優勢:二抗可以加強信號,而且有多種選擇能做不同的測定分析。不加酶標記的一級抗體則能保留它zui多的免疫反應性。

劣勢:交互反應發生的機率較高。

三、雙抗體夾心法:被檢測的抗原包被在兩個抗體之間,其中一個抗體將抗原固定于固相載體上,即捕捉抗體。另一個則是檢測抗體,此抗體可用酶標記后直接測定抗原的量;或不標記,再透過酶標記的二級抗體來測定抗原的量。這兩種抗體必須小心選取,才可避免交互反應或競爭相同的抗原結合部位。

優勢:高靈敏、高專一性,抗原無須事先純化。

劣勢:抗原一定得擁有兩個以上的抗體結合部位。

Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
EXPB-2 植物延展素-β(抗原)
FAS (Apo-a1; CD95;)(抗原) 載脂蛋白-a1
Agtr1/AT1a(Angiotensin II receptor, type 1a) 血管組織血管緊張素Ⅱ1型受體抗原
FasL(抗原)
Ah Receptor(Aryl Hydrocarbon Receptor) 芳香烴受體抗原
Fe65 protein peptide Fe65 蛋白(多肽抗原)
FGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素結合生長因子( 酸性成纖維細胞生長因子)(多肽片斷抗原)
fgL2 (Fibrinogen-like 2) 凝血酶原酶 (又稱:纖維介素蛋白;前凝血素)
FLIP S/L peptide 凋亡調節基因之一(多肽抗原)
FoxP3 叉頭蛋白3-T細胞轉錄因子(多肽抗原)
GAP-43 ( Growth associated protein-43 ) 生長相關蛋白-43(抗原)
Gastrin 胃泌素(抗原)
AMACR/P504S(alpha-methylacyl-CoA racemase) α-甲基酰基輔酶A消旋酶抗原

ELISA試劑盒

 

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