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ELISA試劑盒抗體反應使抗原固相化及原理

時間:2016-9-6閱讀:376
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ELISA試劑盒的基本原理有三條:
(2)抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物,ELISA試劑盒而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性;
(1)抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面,可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附,并保持其免疫學活性;
(3)酶結合物與相應抗原或抗體結合后,可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在,而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的,因此,可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,ELISA試劑盒根據已經使用的結果,認為法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。
   因此含雜質較多的抗原也可采用捕獲包被法,試驗的特異性、敏感性均由此得以改善,重復性亦佳。蛋白質與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結合的,靠的是蛋白質分子結構上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用于。可將聚苯乙烯板先經紫外線照射(例如30W紫外燈,75cm照射12小時),以增加其吸附性能。例如,在檢測抗DNA抗體時,需用DNA作為包被抗原,ELISA試劑盒而普遍的固相載體一般不能直接與核酸結合。換言之,包被即是抗原或抗體結合到固相載體表面的過程。當抗原決定簇存在于或鄰近于疏水區域時,抗原與固相載體的直接吸附可使抗原決定簇不能充分暴露,在這種情況下,直接包被效果不佳,可以采用間接的捕獲包被法,即先將針對該抗原的特異抗體作預包被,其后通過抗原。也可用親和素生物素系統作間接包被,即用親和素先包被載體,然后加入生物素化的DNA,這種包被方法均勻、牢固,已擴大應用于各種抗原物質的定量測定。
CAMSAP1    鈣調素調節蛋白相關蛋白抗體
Claudin 1    緊密連接蛋白1抗體
C1orf149    1號染色體開放閱讀框149抗體
phospho-c-Kit(Tyr823)    磷酸化原癌基因c-kit抗體
phospho-c-Kit(Tyr568 + Tyr570)    磷酸化原癌基因c-kit抗體
phospho-C-REL (Ser503)    磷酸化淋巴細胞衍生C-型凝集素抗體
C2orf39    2號染色體開放閱讀框39抗體
C2orf49    2號染色體開放閱讀框49抗體
C2orf50    2號染色體開放閱讀框50抗體
ERCC8    科凱恩氏綜合癥相關蛋白/早衰蛋白CSA抗體
phospho-Cytokeratin 8 (Ser73)    磷酸化細胞角蛋白8抗體
phospho-Cytokeratin 8 (Ser431)    磷酸化細胞角蛋白8抗體
phospho-CK18(Ser52)    磷酸化細胞角蛋白18抗體
Cytohesin 2    胞粘蛋白2抗體
Cytochrome P450 2A6    細胞色素CPA6抗體
CYP3A1    細胞色素CYP3A抗體
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