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技術(shù)文章

小鼠Ⅰ型膠原α2(COL1α2)ELISA試劑盒

閱讀:430發(fā)布時間:2015-3-30

小鼠Ⅰ型膠原α2(COL1α2)ELISA試劑盒實驗-結(jié)果判定:定量測定   

ELISA操作步驟復(fù)雜,影響反應(yīng)因素較多,特別是固相載體的包被難達到各個體之間的一致,因此在定量測定中,每批測試均須用一系列不同濃度的參考標(biāo)準(zhǔn)品在相同的條件下制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。測定大分子量物質(zhì)的夾心法ELISA,標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍一般較寬,曲線zui高點的吸光度可接近2.0,繪制時常用半對數(shù)紙,以檢測物的濃度為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),將各濃度的值逐點連接,所得曲線一般呈S形,其頭、尾部曲線趨于平坦,*較呈直線的部分是的檢測區(qū)域。甲胎蛋白質(zhì)ELISA測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線示。測定小分子量物質(zhì)常用競爭法,其標(biāo)準(zhǔn)曲線中吸光度與受檢物質(zhì)的濃度呈負(fù)相關(guān)。標(biāo)準(zhǔn)曲線的形狀因試劑盒所用模式的差別而略有不同。ELISA測定的標(biāo)準(zhǔn)曲線示。

小鼠Ⅰ型膠原α2(COL1α2)ELISA試劑盒實驗之顯色   

顯色是ELISA中的zui后一步溫育反應(yīng),此時酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時間仍是影響顯色的因素。在一定時間內(nèi),陰性孔可保持無色,而陽性孔則隨時間的延長而呈色加強。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進行。在定量測定中,加入底物后的反應(yīng)溫度和時間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測定的顯色可在室溫進行,時間一般不需要嚴(yán)格控制,有時可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時間,及時判斷。   

OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深,再延長反應(yīng)時間,可使本底值增高。OPD底物液受光照會自行變色,顯色反應(yīng)應(yīng)避光進行,顯色反應(yīng)結(jié)束時加入終止液終止反應(yīng)。OPD產(chǎn)物用硫酸終止后,顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。   

TMB受光照的影響不大,可在室溫中置于操作臺上,邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為保證實驗結(jié)果的穩(wěn)定性,宜在規(guī)定的適當(dāng)時間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后,約40分鐘顯色達,隨即逐漸減弱,至2小時后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時間(12-24小時)不褪,是目視判斷的良好終止劑。此外,各類酸性終止液則會使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時可用特定的波長(450nm)測讀吸光值。 

小鼠Ⅰ型膠原α2(COL1α2)ELISA試劑盒實驗之比色   

比色前應(yīng)先用潔凈的吸水紙拭干板底附著的液體,然后將板正確放入酶標(biāo)比色儀的比色架中。以軟板為載體的試驗,需先將板置于標(biāo)準(zhǔn)96孔的座架中,才可進行比色。在加底物液顯色前,先將軟板邊緣剪凈,這樣,此板就可*平妥坐入座架中。比色時應(yīng)先以蒸餾水校零點,測讀底物孔(未經(jīng)任何反應(yīng)僅加底物液的孔)和空白孔(以生理鹽水或稀釋液代替標(biāo)本作全過程的孔),以記錄本次試驗的試劑狀況。其后可用空白孔以蒸餾水校零點,以上各孔的吸光度需減去空白孔的吸光度,然后進行計算。   

比色結(jié)果的表達以往通用光密度(oplical density,OD),現(xiàn)按規(guī)定用吸光度(absorbence,A),兩者含義相同。通常的表示方法是,將吸收波長寫于A字母的右下角,如OPD的吸收波長為492nm,表示方法為"A492nm"或"OD492nm"。

小鼠Ⅰ型膠原α2(COL1α2)ELISA試劑盒相關(guān)產(chǎn)品如下:HZ-EL-R0194c 大鼠趨化素樣因子超家族7(cklfsf7)檢測試劑盒 Rat CKLFSF7 (Chemokine Like Factor Superfamily 7) ELISA Kit
HZ-EL-R0195c 大鼠趨化素樣因子超家族10(cklfsf10)檢測試劑盒 Rat CKLFSF10 (Chemokine Like Factor Superfamily 10) ELISA Kit
HZ-EL-R0196c 大鼠膽囊收縮素受體(CCKAR)檢測試劑盒 Rat CCKAR (Cholecystokinin A Receptor) ELISA Kit
HZ-EL-R0198c 大鼠*酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)檢測試劑盒 Rat CETP (Cholest Erolester Transfer Protein) ELISA Kit
HZ-EL-R0199c 大鼠血管緊張素原(AGT)檢測試劑盒 Rat AGT (Angiotensinogen) ELISA Kit
HZ-EL-R0200c 大鼠*(CH)檢測試劑盒 Rat CH (Cholesterol) ELISA Kit
HZ-EL-R0201c 大鼠毒蕈堿型*受體M2(CHRM2)檢測試劑盒 Rat CHRM2 (Cholinergic Receptor, Muscarinic 2) ELISA Kit
HZ-EL-R0203c 大鼠絨毛膜*(CG)檢測試劑盒 Rat CG (Chorionic Gonadotrophin) ELISA Kit
HZ-EL-R0204c 大鼠染色質(zhì)解旋酶基因結(jié)合蛋白3(CHD3)檢測試劑盒 Rat CHD3 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 3) ELISA Kit
HZ-EL-R0205c 大鼠染色質(zhì)解旋酶基因結(jié)合蛋白5(CHD5)檢測試劑盒 Rat CHD5 (Chromodomain Helicase DNA Binding Protein 5) ELISA Kit
HZ-EL-R0206c 大鼠嗜鉻粒蛋白A(CHGA)檢測試劑盒 Rat CHGA (Chromogranin A) ELISA Kit
HZ-EL-R0207c 大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CNTF)檢測試劑盒 Rat CNTF (Ciliary Neurotrophic Factor) ELISA Kit
HZ-EL-R0208c 大鼠*耐性相關(guān)表達蛋白質(zhì)(CROP)檢測試劑盒 Rat CROP (Cisplatin Resistance Associated Overexpressed Protein) ELISA Kit
HZ-EL-R0209c 大鼠檸檬酸合酶(CS)檢測試劑盒 Rat CS (Citrate Synthase) ELISA Kit
HZ-EL-R0210c 大鼠(c-jun) 檢測試劑盒 Rat c-jun ELISA Kit
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HZ-EL-R0212c 大鼠克拉拉細(xì)胞蛋白(CC17) 檢測試劑盒 Rat CC17 (Clara Cell Protein) ELISA Kit
HZ-EL-R0213c 大鼠白細(xì)胞分化抗原109(CD109)檢測試劑盒 Rat CD109 (Cluster Of Differentiation 109) ELISA Kit
HZ-EL-R0214c 大鼠白細(xì)胞分化抗原3(CD3)檢測試劑盒 Rat CD3 (Cluster of Differentiation 3) ELISA Kit
HZ-EL-R0215c 大鼠白細(xì)胞分化抗原30配體(CD30L)檢測試劑盒 Rat CD30L (Cluster Of Differentiation 30 Ligand) ELISA Kit
HZ-EL-R0216c 大鼠白細(xì)胞分化抗原30(CD30)檢測試劑盒 Rat CD30 (Cluster of differentiation 30) ELISA Kit
HZ-EL-R0217c 大鼠白細(xì)胞分化抗原40配體(CD40L)檢測試劑盒 Rat CD40L (Cluster Of Differentiation 40 Ligand) ELISA Kit
HZ-EL-R0218c 大鼠白細(xì)胞分化抗原6(CD6)檢測試劑盒 Rat CD6 (Cluster of Differentiation 6) ELISA Kit
HZ-EL-R0219c 大鼠白細(xì)胞分化抗原8(CD8)檢測試劑盒 Rat CD8 (Cluster of Differentiation 8) ELISA Kit
HZ-EL-R0220c 大鼠白細(xì)胞分化抗原97(CD97)檢測試劑盒 Rat CD97 (Cluster of Differentiation 97) ELISA Kit
HZ-EL-R0221c 大鼠白細(xì)胞分化抗原44(CD44)檢測試劑盒 Rat CD44 (Cluster of Differentiation) ELISA Kit
HZ-EL-R0222c 大鼠叢生蛋白(CLU)檢測試劑盒 Rat CLU (Clusterin) ELISA Kit
HZ-EL-R0223c 大鼠*Ⅱ(FⅡ)檢測試劑盒 Rat FⅡ(Coagulation Factor Ⅱ)ELISA Kit


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