銜接蛋白β抗體(antibody,Ab)是機(jī)體免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后產(chǎn)生的特異性球蛋白,稱免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子結(jié)構(gòu)和抗原性的不同,可將為類Ig分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大類。由遺傳基因決定所產(chǎn)生的抗體,稱天然抗體(natural antibody),由抗原激發(fā)免疫細(xì)胞產(chǎn)生的抗體,稱免疫抗體(immune antibody)或稱特異地性抗體。人工制備的特異性抗體又可分為多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
檢測(cè)病原體常用的銜接蛋白β抗體有人工制備的特異性多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
操作步驟:
1取適量Protein A+G Beads懸液,裝入層析柱,用10倍柱體積的PBS(或者TBS,下同)洗滌平衡層析柱。
2含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調(diào)整pH以及離子濃度后(確認(rèn)pH值為7±0.5),緩慢加入層析柱。
3用10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無(wú)蛋白檢出。
4加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封閉流出管,靜置5分鐘后收集穿出液,重復(fù)三次。測(cè)定 OD280估算抗體濃度,如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測(cè)純度。也可以選擇0.1 M*(Glycine, pH 3.0)洗脫。
5洗脫后的抗體立即加入2/5體積的1 M Tris,pH 9.0中和,使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液,或者透析,緩沖液通常為PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
6濃縮到所需體積,加入50%甘油;測(cè)定效價(jià)后,分裝并保存在-20℃,避免凍結(jié)。
相關(guān)產(chǎn)品如下:hz-4836R CXC-R2 CXCR2/CD182
hz-4838R HE4 附睪分泌蛋白4抗體
hz-4839R nonstructural protein 1/NS1 A型流感病毒-NS1抗體(神經(jīng)氨酸酶1)
hz-4846R Factor VII *7抗體
hz-4847R phospho-ITGB4(Tyr1530) 磷酸化整合素β4抗體
hz-4848R phospho-RUNX3(Ser338) 磷酸化Runx3抗體
hz-4849R GLUT2 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2
hz-4850R Collagen II/Chondrocalcin Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體
hz-4851R Collagen II/Chondrocalcin Ⅱ型膠原α1蛋白/軟骨鈣素抗體
hz-4852R PIM3 */*蛋白激酶PIM3抗體
hz-4856R Hepatitis C Virus NS5a 丙型肝炎病毒NS5A抗體
hz-4857R Hepatitis C Virus NS4B 丙型肝炎病毒NS4B抗體
hz-4858R Hepatitis C Virus RNA-directed RNA polymerase 丙型肝炎病毒NS4B(65kDa)抗體
hz-4862R SORBS2/ArgBP2 *結(jié)合蛋白2抗體
hz-4865R BNP 腦鈉素/利鈉肽抗體
hz-4867R p70 S6 kinase beta 核糖體蛋白S6激酶1抗體
hz-4869R CD20 CD20抗體
hz-4871R Complhzent C3 beta chain 補(bǔ)體C3b抗體
hz-4872R C3a/C3a anaphylatoxin 補(bǔ)體C3a過(guò)敏毒素抗體
hz-4873R Complhzent C3b alpha' chain 補(bǔ)體C3b-α鏈抗體
hz-4884R CD33/Siglec-3 CD33抗體
hz-4886R TRhz1 髓系細(xì)胞觸發(fā)受體1抗體
hz-4890R CD24 CD24抗體
hz-4891R CD24 CD24抗體
hz-4892R APOE/Apo E2 載脂蛋白E抗體
hz-4895R PIRH2 泛素連接酶抗體
hz-4902R Calponin 1/2/3 鈣結(jié)合蛋白Calponin抗體
hz-4905R SORBS2/ArgBP2 *結(jié)合蛋白2抗體
hz-4906R SLC40A1/FPN1 細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白FP1抗體
hz-4907R TGF beta 3 轉(zhuǎn)移生長(zhǎng)因子β3(TGFβ3)抗體
hz-4908R TGF beta 1/LAP 轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGFβ)抗體