DNA損傷自噬調(diào)整蛋白抗體(antibody,Ab)是機體免疫系統(tǒng)受到抗原刺激后產(chǎn)生的特異性球蛋白,稱免疫球蛋白(immunoglobulin,Ig)。根據(jù)其重鏈穩(wěn)定區(qū)的分子結(jié)構(gòu)和抗原性的不同,可將為類Ig分為IgG、IgA、IgM、IgD和IgE等五大類。由遺傳基因決定所產(chǎn)生的抗體,稱天然抗體(natural antibody),由抗原激發(fā)免疫細(xì)胞產(chǎn)生的抗體,稱免疫抗體(immune antibody)或稱特異地性抗體。人工制備的特異性抗體又可分為多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
檢測病原體常用的DNA損傷自噬調(diào)整蛋白抗體有人工制備的特異性多克隆抗體、單克隆抗體和基因工程抗體三種類型。
DNA損傷自噬調(diào)整蛋白抗體操作步驟:
1取適量Protein A+G Beads懸液,裝入層析柱,用10倍柱體積的PBS(或者TBS,下同)洗滌平衡層析柱。
2含抗體的血清或其它體液高速離心后,將上清與等體積2×PBS緩沖液混合,調(diào)整pH以及離子濃度后(確認(rèn)pH值為7±0.5),緩慢加入層析柱。
3用10倍柱體積以上的PBS洗滌,至流出液無蛋白檢出。
4加入2倍柱體積0.1 M 檸檬酸(Citrate Acid, pH 2.7)封閉流出管,靜置5分鐘后收集穿出液,重復(fù)三次。測定 OD280估算抗體濃度,如果所得抗體較多可以使用SDS-PAGE檢測純度。也可以選擇0.1 M*(Glycine, pH 3.0)洗脫。
5洗脫后的抗體立即加入2/5體積的1 M Tris,pH 9.0中和,使用Millipore蛋白濃縮管切換到所需緩沖液,或者透析,緩沖液通常為PBS含有0.02% NaN3以及1 mM EDTA。
6濃縮到所需體積,加入50%甘油;測定效價后,分裝并保存在-20℃,避免凍結(jié)。
DNA損傷自噬調(diào)整蛋白抗體相關(guān)產(chǎn)品如下:hz-7798R Flotillin 1 脂閥結(jié)構(gòu)蛋白1抗體
hz-7799R GAJ/MND1 減數(shù)分裂核分裂蛋白1抗體
hz-7800R GLP2R 胰高血糖素樣肽2受體抗體
hz-1116R AMPK beta 1 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體
hz-7801R GPIP137 糖磷脂酰肌醇錨定蛋白137抗體
hz-7802R GRASP65 高爾基體外周膜蛋白p65抗體
hz-3967R AMPK beta 2 腺苷單磷酸活化蛋白激酶β2抗體
hz-7803R HCF-1 宿主細(xì)胞因子1抗體
hz-7804R KIF15 驅(qū)動蛋白家族成員15抗體
hz-7805R KIFC1 驅(qū)動蛋白家族成員C1抗體
hz-3026R phospho-AMPK beta 1(Ser108) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體
hz-3027R phospho-PRKAB1(Ser182) 磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體
hz-3911R AMPK gamma 1 腺苷酸活化蛋白激酶γ1抗體
hz-7806R KLHDC5 kelch樣蛋白5抗體
hz-4017R phospho-C-Myc(Thr358) 磷酸化致癌基因C-Myc抗體
hz-4018R phospho-C-Myc(Thr373) 磷酸化致癌基因C-Myc抗體
hz-7807R KLHL22 Kelch樣蛋白22抗體
hz-7808R KNTC1/Kinetochore 著絲點關(guān)聯(lián)蛋白1抗體
hz-3968R AMPK gamma 3/PRKAG3 腺苷酸活化蛋白激酶γ3抗體
hz-7809R LRRC62 富含*重復(fù)蛋白62抗體
hz-7810R MFAP1 微原纖維膠原相關(guān)蛋白1抗體
hz-7811R MNS1 減數(shù)分裂特異核結(jié)構(gòu)蛋白1抗體
hz-7812R MPP9/MPHOSPH9 有絲分裂細(xì)胞周期蛋白MPP9抗體
hz-7813R NEDD1 神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)蛋白1抗體
hz-7814R NEK1 */*蛋白激酶NEK1抗體
hz-7815R NEK8 */*蛋白激酶NEK8抗體
hz-7816R NSP5 核結(jié)構(gòu)蛋白5抗體
hz-5980R n-Myc 致癌基因n-Myc抗體
hz-7817R NUBP1 核苷酸結(jié)合蛋白1抗體