DIY夾心法ELISA試劑盒常見(jiàn)技術(shù)指南：
1、選擇抗體時(shí)選擇一個(gè)單抗和一個(gè)多抗進(jìn)行配對(duì)；若選擇兩個(gè)單抗，必須識(shí)別不同表位的抗體；從同一家公司選擇抗體對(duì)。
2、ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中為了確定*信號(hào)和zui低背景應(yīng)將捕獲抗體（0.5-4μg/ml）和檢測(cè)抗體（0.25-2μg/ml）在預(yù)實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行彼此相抗的滴定。同時(shí)，應(yīng)包括在適當(dāng)范圍內(nèi)的標(biāo)準(zhǔn)品的系列稀釋。按試劑說(shuō)明書(shū)常規(guī)提供的范圍進(jìn)行操作。
3、標(biāo)準(zhǔn)品的配制：對(duì)于每種細(xì)胞因子應(yīng)仔細(xì)閱讀說(shuō)明書(shū)，注意每批的細(xì)節(jié)。在使用細(xì)胞因子前，瞬時(shí)離心試劑瓶，盡可能多地收回其中的細(xì)胞因子。根據(jù)每批說(shuō)明書(shū)中的細(xì)節(jié)，將凍干的細(xì)胞因子復(fù)溶。
4、一般待測(cè)抗原標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性范圍的可通過(guò)將標(biāo)準(zhǔn)品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml 到15pg/ml。可利用標(biāo)準(zhǔn)的ELISA試劑盒操作流程、放大試劑盒、第三類試劑、或改變酶底物系統(tǒng)可在一定范圍內(nèi)提高靈敏度。
5、為了優(yōu)化靈敏度，建議過(guò)夜孵育標(biāo)準(zhǔn)品和標(biāo)本。
6、若使用過(guò)氧化物酶作為顯色系統(tǒng)，應(yīng)嚴(yán)禁在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過(guò)氧化物酶的活性。
7、當(dāng)測(cè)定混合液體中的抗原時(shí)，如血清，建議在標(biāo)本稀釋液中加不相干的Ig.Galectin 1 半乳糖凝集素1抗體
AIF1 離子鈣接頭蛋白抗體
IRX4 Iroquois同源蛋白4抗體
IFRD1 干擾素相關(guān)發(fā)育調(diào)節(jié)蛋白1抗體（神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白PC4）
ILP2 抑制細(xì)胞凋亡樣蛋白2抗體
IFITM1 干擾素誘導(dǎo)跨膜蛋白1抗體
IFI44 干擾素誘導(dǎo)蛋白44抗體
ITPR3 5-三磷酸肌醇受體3抗體
IFNW1 干擾素omega 1蛋白抗體
IFNA7 干擾素alpha 7蛋白抗體
IFN-Beta 干擾素β抗體
ID1 DNA結(jié)合抑制因子1抗體
IFI-202 γ干擾素誘導(dǎo)蛋白202抗體
intestinal FABP/IFABP/FABP2 腸型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體
ING1 生長(zhǎng)抑制因子基因1抗體
IL-8/CXCL8 白介素8抗體
ILK-1 整合素連接激酶-1抗體
phospho-IKK alpha (Ser176 + Ser180) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α抗體
Phospho-IKK alpha(Ser180) + IKK beta(Ser181) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗體
Phospho-IKK alpha/beta (Ser176 + Ser180) 磷酸化KB抑制蛋白激酶α/β抗體
IFT46 細(xì)胞纖毛內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)同源蛋白46抗體
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