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經(jīng)營模式:生產(chǎn)廠家

商鋪產(chǎn)品:9956條

所在地區(qū):上海上海市

聯(lián)系人:王先生 (經(jīng)理)

技術(shù)文章

OT/BGP ELISA檢測試劑盒操作流程

閱讀:622發(fā)布時(shí)間:2019-9-27

              OT/BGP ELISA檢測試劑盒操作流程

首先映入我眼簾的是那一大片鮮艷的一串紅,一串紅的葉子并不引人注意,引人注意的是一串紅的花,那鮮艷的小花,開得嬌巧別致,一簇足有數(shù)十朵,長在翠綠的莖上,就像一串串用綠線連起來的紅鈴鐺。他們一朵朵緊密排列,整齊劃一,就像我們班組成的一個(gè)紀(jì)律嚴(yán)明緊密團(tuán)結(jié)的集體。仔細(xì)觀看,花兒里面還藏有像頭發(fā)一樣的小花。微風(fēng)拂過,玲瓏別致的花朵輕輕搖曳著,向你點(diǎn)頭,好像一個(gè)個(gè)小朋友正張著笑臉朝你笑呢。接下來介紹   OT/BGP ELISA檢測試劑盒操作流程

樣本處理及要求:

1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。

2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。

3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆?。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 不能檢測含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

試劑盒組成及試劑配制 :

1. 酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔)。

2. 標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。

3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶

4. *標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6. *標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)

7. 辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)

8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。


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