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ELISA透析袋如何使用
閱讀：1267 發(fā)布時間：2015-6-3透析已成為生物化學(xué)實驗室zui 簡便zui常用的分離純化技術(shù)之一。在生物大分子的制備過程中，除鹽、除少量有機(jī)溶劑、除 去生物小分子雜質(zhì)和濃縮樣品等都要用到透析的技術(shù)。 透析只需要使用的半透膜即可完成。通常是將半透膜制成袋狀，將生物大分子樣品 溶液置入袋內(nèi)， 將此透析袋浸入水或緩沖液中， ELISA樣品溶液中的大分子量的生物大分子被截留 在袋內(nèi)，而鹽和小分子物質(zhì)不斷擴(kuò)散透析到袋外，直到袋內(nèi)外兩邊的濃度達(dá)到平衡為止。保留在透析袋內(nèi)未透析出的樣品溶液稱為“保留液"，袋（膜）外的溶液稱為“滲出液"或“透析 液"。
透析的動力是擴(kuò)散壓，擴(kuò)散壓是由橫跨膜兩邊的濃度梯度形成的。透析的速度反比于膜 的厚度，正比于欲透析的小分子溶質(zhì)在膜內(nèi)外兩邊的濃度梯度，還正比于膜的面積和溫度， 通常是 4℃透析，升高溫度可加快透析速度。 透析膜可用動物膜和玻璃紙等，但用的zui多的還是用纖維素制成的透析膜，目前常用的 是美國 Union Carbide （聯(lián)合碳化物公司）和美國光譜醫(yī)學(xué)公司的各種尺寸的透析管， 截留分子量 MwCO（即留在透析袋內(nèi)的生物大分子的zui小分子量，縮寫為 MwCO）通常為 1 萬左右。 商品透析袋制成管狀，其扁平寬度為 23 mm～50 mm 不等。為防干裂，出廠時都用 10％ 的甘油處理過，并含有極微量的硫化物、重金屬和一些具有紫外吸收的雜質(zhì)，它們對蛋白質(zhì) 和其它生物活性物質(zhì)有害，用前必須除去。可先用 50％乙醇煮沸 1 小時，再依次用 50％乙 醇、0.01 mol/LELISA 碳酸氫鈉和 0.001 mol/L EDTA 溶液洗滌，zui后用蒸餾水沖洗即可使用。實 驗證明， 50％乙醇處理對除去具有紫外吸收的雜質(zhì)特別有效。
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