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上海一研生物科技有限公司>技術文章>ELISA試劑盒的實驗原理

技術文章

ELISA試劑盒的實驗原理

閱讀:1269          發布時間:2016-7-15

由于“人原鈣黏素1”具有的特異性,抗原抗體的結合發生在抗原的決定簇與抗體的結合位點之間。那么人原鈣黏素1 ELISA試劑盒洗板方法有以下兩點。

1.  自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。待檢樣本:體液、血清、血漿、細胞培養上清液、尿液、組織勻漿、心房水標本等

2.  手工洗板方法:ELISA試劑盒吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內,浸泡1-2分鐘,根據需要,重復此過程數次。

人原鈣黏素ELISA試劑盒的樣品采集方法,是收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在4℃備用,如有特殊原因需要周期收集標本,將標本及時分裝后放在-20℃或-70℃條件下保存。避免反復凍融。標本2-8℃可保存48小時,-20℃可保存1個月。-70℃可保存6個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

實驗原理:用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗L-LDH抗體的微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的抗L-LDH抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,ELISA試劑盒并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的L-LDH呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

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