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閱讀:291發(fā)布時(shí)間:2016-3-24
ELISA試劑盒20世紀(jì)后期免疫學(xué)技術(shù)的重大突破,應(yīng)用B細(xì)胞雜交瘤技術(shù)產(chǎn)生單克隆抗體(McAb)。 B細(xì)胞雜交瘤是免疫的小鼠脾細(xì)胞 (B淋巴細(xì)胞)與小鼠骨髓瘤(一種漿細(xì)胞瘤,漿細(xì)胞是B淋巴細(xì)胞系的終末形式)細(xì)胞融合而成的雜交細(xì)胞,其核內(nèi)含有雙親細(xì)胞的染色體,繼承了親代細(xì)胞的特征,它既具有瘤細(xì)胞在體外培養(yǎng)中迅速增殖的能力,又具備免疫脾細(xì)胞合成和分泌特異性抗體的特性。B細(xì)胞雜交瘤經(jīng)過(guò)單個(gè)細(xì)胞培養(yǎng),可繁殖成為一個(gè)細(xì)胞系(稱為克隆或克隆系),這個(gè)過(guò)程稱為克隆化,而由一個(gè)克隆系產(chǎn)生的抗體稱單克隆抗體。這種抗體只能特異地與抗原分子上的一個(gè)抗原決定簇結(jié)合反應(yīng),抗體成分均一,抗體的結(jié)構(gòu)、氨基酸順序、特異性等都是一致的,且在培養(yǎng)過(guò)程中只要不發(fā)生變異,不同時(shí)間內(nèi)分泌的抗體都能保持同樣的結(jié)構(gòu)和功能。因此,用這種技術(shù)可按人們的意愿大量很純的單克隆抗體,這些都是用普通血清學(xué)方法所不能達(dá)到的。這技術(shù)在醫(yī)學(xué)和生物學(xué)各個(gè)領(lǐng)域中得到廣泛應(yīng)用,并為臨床疾病的診斷、治療提供了新手段。單克隆抗體與普通抗血清抗體的區(qū)別見(jiàn)圖。帶有多個(gè)抗原決定簇的抗原分子注入動(dòng)物體內(nèi),被帶有相應(yīng)抗原決定簇受體的淋巴細(xì)胞所識(shí)別,它們活化、增殖,每一個(gè) B細(xì)胞系分別分泌針對(duì)單個(gè)抗原決定簇的抗體分子。普通抗血清是含有這些抗體的混合物。而將免疫小鼠的淋巴細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合形成雜交瘤細(xì)胞,經(jīng)過(guò)克隆化,所產(chǎn)生的抗體是高度純一的單克隆抗體。
單克隆抗體在臨床上的應(yīng)用 單克隆抗體用于臨床診斷和治療,目前研究較多的是抗人 T細(xì)胞單克隆抗體,用以識(shí)別人T細(xì)胞表面的不同抗原決定簇,有OKT系統(tǒng)及Leu系統(tǒng)。T細(xì)胞,特別是免疫調(diào)節(jié)T細(xì)胞(Ti/h及Tc/s細(xì)胞)對(duì)于調(diào)控免疫應(yīng)答和維持免疫自穩(wěn)起著至關(guān)重要的作用,臨床上許多疾病的發(fā)生與免疫調(diào)節(jié)失常有關(guān),因此,研究 T細(xì)胞在這些疾病中的變化,有助于探討病因和輔助診斷。各種免疫缺損病、腫瘤或感染性疾病都與免疫功能低下有關(guān),而變態(tài)反應(yīng)性疾病、自身免疫性疾病等與免疫功能亢進(jìn)有關(guān)。因此應(yīng)用 OKT系列單克隆抗體檢測(cè)這些疾病患者外周血中T細(xì)胞亞群及T4/T8比值的變化,對(duì)探討發(fā)病機(jī)理,及時(shí)診斷疾病及監(jiān)測(cè)病情發(fā)展有十分重要的意義。接受腎移植或骨髓移植的患者往往需應(yīng)用各種免疫抑制劑以控制排斥反應(yīng), T細(xì)胞亞群的檢測(cè)有助于了解移植器官的排異和發(fā)展。
單克隆抗體在臨床上的應(yīng)用 單克隆抗體用于臨床診斷和治療,目前研究較多的是抗人 T細(xì)胞單克隆抗體,用以識(shí)別人T細(xì)胞表面的不同抗原決定簇,有OKT系統(tǒng)及Leu系統(tǒng)。T細(xì)胞,特別是免疫調(diào)節(jié)T細(xì)胞(Ti/h及Tc/s細(xì)胞)對(duì)于調(diào)控免疫應(yīng)答和維持免疫自穩(wěn)起著至關(guān)重要的作用,臨床上許多疾病的發(fā)生與免疫調(diào)節(jié)失常有關(guān),因此,研究 T細(xì)胞在這些疾病中的變化,有助于探討病因和輔助診斷。各種免疫缺損病、腫瘤或感染性疾病都與免疫功能低下有關(guān),而變態(tài)反應(yīng)性疾病、自身免疫性疾病等與免疫功能亢進(jìn)有關(guān)。因此應(yīng)用 OKT系列單克隆抗體檢測(cè)這些疾病患者外周血中T細(xì)胞亞群及T4/T8比值的變化,對(duì)探討發(fā)病機(jī)理,及時(shí)診斷疾病及監(jiān)測(cè)病情發(fā)展有十分重要的意義。接受腎移植或骨髓移植的患者往往需應(yīng)用各種免疫抑制劑以控制排斥反應(yīng), T細(xì)胞亞群的檢測(cè)有助于了解移植器官的排異和發(fā)展。抗人T細(xì)胞單克隆抗體可用以治療白血病、移植物抗宿主反應(yīng)(GVHD)和急性腎排斥等,目前尚處于摸索階段。
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