elisa檢測試劑盒免疫共沉淀原理是：當細胞在非變性條件下被裂解時，完整細胞內存在的許多蛋白質－蛋白質間的相互作用被保留了下來。這種方法常用于測定兩種目標蛋白質是否在體內結合；也可用于確定一種特定蛋白質的新的作用搭檔。
其優點為：（1）相互作用的蛋白質都是經翻譯后修飾的，處于天然狀態；（2）蛋白的相互作用是在自然狀態下進行的，可以避免人為的影響；（3）可以分離得到天然狀態的相互作用蛋白復合物。缺點為：（1）可能檢測不到低親和力和瞬間的蛋白質－蛋白質相互作用；（2）兩種蛋白質的結合可能不是直接結合，而可能有第三者在中間起橋梁作用；（3）必須在實驗前預測目的蛋白是什么，以選擇zui后檢測的抗體，所以，若預測不正確，實驗就得不到結果，方法本身具有冒險性。
二、準備工作：
預冷PBS，RIPA Buffer，細胞刮子（用保鮮膜包好后，埋冰下），離心機
1. 用預冷的PBS洗滌細胞兩次，zui后一次吸干PBS；
2. 加入預冷的RIPA Buffer(1ml/107個細胞、10cm培養皿或150cm2培養瓶，0.5ml/5×106個細胞、6cm培養皿、75cm2培養瓶)
3. 用預冷的細胞刮子將細胞從培養皿或培養瓶上刮下，把懸液轉到1.5EP管中，4℃，緩慢晃動15min（EP管插冰上，置水平搖床上）
4. 4℃，14000g離心15min，立即將上清轉移到一個新的離心管中
5. 準備Protein A agarose，用PBS 洗兩遍珠子，然后用PBS配制成50%濃度，建議減掉槍尖部分，避免在涉及瓊脂糖珠的操作中破壞瓊脂糖珠
6. 每1ml總蛋白中加入100μl Protein A瓊脂糖珠（50%），4℃搖晃10min（EP管插冰上，置水平搖床上），以去除非特異性雜蛋白，降低背景
7. 4℃，14000g離心15min，將上清轉移到一個新的離心管中，去除Protein A珠子
8. (Bradford 法)做蛋白標準曲線，測定蛋白濃度，測前將總蛋白至少稀釋1：10倍以上，以減少細胞裂解液中去垢劑的影響（定量，分裝后，可以在-20℃保存一個月）
9. 用PBS將總蛋白稀釋到約1 μg/μl，以降低裂解液中去垢劑的濃度，如果興趣蛋白在細胞中含量較低，則總蛋白濃度應該稍高（如10 μg/μl）
10. 加入一定體積的兔抗到500μl總蛋白中，抗體的稀釋比例因興趣蛋白在不同細胞系中的多少而異
11. 4℃緩慢搖動抗原抗體混合物過夜或室溫2h，激酶或磷酸酯酶活性分析建議用2 h室溫孵育
12. 加入100μl Protein A瓊脂糖珠來捕捉抗原抗體復合物，4℃緩慢搖動抗原抗體混合物過夜或室溫1h，如果所用抗體為鼠抗或雞抗，建議加2 μl"過渡抗體"（兔抗鼠IgG，兔抗雞IgG）
13. 14000rpm瞬時離心5s，收集瓊脂糖珠-抗原抗體復合物，去上清，用預冷的RIPA buffer洗3遍，800μl/遍，RIPA buffer有時候會破壞瓊脂糖珠-抗原抗體復合物內部的結合，可以使用PBS
14. 用60μl 2×上樣緩沖液將瓊脂糖珠-抗原抗體復合物懸起，輕輕混勻，緩沖液的量依據上樣多少的需要而定（60 μl足夠上三道）
15. 將上樣樣品煮5min，以游離抗原，抗體，珠子，離心，將上清電泳，收集剩余瓊脂糖珠，上清也可以暫時凍-20℃，留待以后電泳，電泳前應再次煮5min變性。
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2-氯-5-甲基吡嗪 CAS號： 59303-10-5 進口、組裝
2-甲基-6-三氟甲基苯胺 CAS號： 88301-98-8 進口、組裝
3-溴噠嗪 CAS號： 88491-61-6 進口、組裝
N-BOC-3-環己酮胺 CAS號： 885280-38-6 進口、組裝
6-溴-1H-吲唑-4-甲酸 CAS號： 885523-08-0 進口、組裝
2-氯嘧啶-5-羧酸乙酯 CAS號： 89793-12-4 進口、組裝
7-碘吲哚 CAS號： 89976-15-8 進口、組裝
3,5-二氟芐胺 CAS號： 90390-27-5 進口、組裝
2-氯吩噻嗪 CAS號： 92-39-7 進口、組裝
對羥基聯苯 CAS號： 92-69-3 進口、組裝
反式-2-己烯-1-醇 CAS號： 928-95-0 進口、組裝
吲哚-3-甲酸甲酯 CAS號： 942-24-5 進口、組裝
(5-氟吡啶-2-基)硼酸 CAS號： 946002-10-4 進口、組裝
3-氨基呋喃-2-甲酸甲酯 CAS號： 956034-04-1 進口、組裝
1,2,4-*基苯 CAS號： 95-63-6 進口、組裝
2-甲硫基-4-溴嘧啶 CAS號： 959236-97-6 進口、組裝
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