二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC)檢測(cè)試劑盒操作步驟
1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
900ng/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
450ng/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
225ng/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
112.5ng/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
56.25ng/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿(mǎn)洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。
實(shí)驗(yàn)材料與試劑配制：
1.儀器與材料：酶標(biāo)儀（使用前預(yù)熱30分鐘），微量加液器、吸頭、蒸餾水或去離子水，濾紙。
2.洗液的配制：按1:30的比例配制洗液備用。
樣品收集、處理及保存
1.細(xì)胞培養(yǎng)上清：適用于檢測(cè)體外培養(yǎng)的細(xì)胞分泌性成份。用無(wú)菌管收集細(xì)胞上清液，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
2.細(xì)胞：用PBS反復(fù)洗滌細(xì)胞3次，調(diào)整細(xì)胞濃度達(dá)到104-106/ml 左右，通過(guò)反復(fù)凍融，使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份，或者細(xì)胞超聲粉碎，離心取上清液檢測(cè)。
3.血清：在室溫下，血液自然凝固，以1000×g離心15分鐘，取上清待測(cè)。
4.血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA 或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合后靜置10-20 分鐘后，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
5.體液：包括胸腹水、腦脊液，分泌物等。使用不含熱原和內(nèi)毒素的離心管收集，以1000×g離心15分鐘，收集上清。
6.組織標(biāo)本：切取組織標(biāo)本，稱(chēng)取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或勻漿器，或超聲破碎儀將標(biāo)本勻漿，以2000-3000rmp離心20 分鐘，收集上清進(jìn)行檢測(cè)。
7.樣品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。
8.保存：如果樣品不能立即檢測(cè)，應(yīng)將其分裝，-70 ℃保存，避免反復(fù)冷凍。保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。血液標(biāo)本盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量顆粒，檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC)檢測(cè)試劑盒大鼠水通道蛋白5(AQP-5)ELISA Kit，48T/96T
人血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA Kit，48T/96T
小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA Kit，48T/96T
大鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA Kit，48T/96T
人細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA Kit，48T/96T
小鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA Kit，48T/96T
大鼠細(xì)胞周期素D1(Cyclin-D1)ELISA Kit，48T/96T
人細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA Kit，48T/96T
小鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA Kit，48T/96T
大鼠細(xì)胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA Kit，48T/96T
人細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA Kit，48T/96T
小鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA Kit，48T/96T
大鼠細(xì)胞周期素D3(Cyclin-D3)ELISA Kit，48T/96T
人丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA Kit，48T/96T
小鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA Kit，48T/96T
大鼠丙酮酸激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISA Kit，48T/96T
人血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA Kit，48T/96T
小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA Kit，48T/96T
大鼠血紅素氧合酶2(HO-2)ELISA Kit，48T/96T
人硫酸角質(zhì)素(KS)ELISA Kit，48T/96T
人抗增殖細(xì)胞核抗原抗體(PCNA)ELISA Kit，48T/96T
二級(jí)淋巴組織趨化因子(SLC)檢測(cè)試劑盒
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