人胚肺二倍體細胞;2BS特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞名稱 人胚肺二倍體細胞;2BS特性
形態特性 成纖維細胞樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 人胚肺二倍體細胞,來自于女孩胚胎,1976年由北京生物制品研究所建株
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 新生牛血清,10%;水解乳蛋白,10%
傳代方法 1:2-1:4
傳代情況 P21
凍存條件 基礎培養液+20%牛血清+10%DMSO
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X; D7S820:8,11;CSF1PO:10,12;D13S317:8,11;D16S539:9,12;D18S51:14,17;D21S11:29,30;D3S1358:15;D5S818:11;D8S1179:11,13;FGA:19,22;PentaD:11,13;PentaE:7,11;TH01:7,9;TPOX:8,10;vWA:18
同工酶 人B,NP,G7PG,MD,AST
染色體
使用權限 A類
產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
| 成纖維細胞樣 | 上海 | 3-5天 |
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
GLRB 英文名稱: *受體β/GlyR β抗體 ?0.2ml
GALP 英文名稱: 神經甘丙肽樣肽GALP抗體 ?0.1ml
GALR2 英文名稱: 甘丙肽受體2抗體 ?0.2ml
GALR3 英文名稱: 甘丙肽受體3抗體 ?0.2ml
Ghrelin Receptor 英文名稱: 腦腸肽受體抗體 ?0.1ml
GRC5 英文名稱: GRC5蛋白抗體 ?0.2ml
Gbx1 英文名稱: 腸和大腦特定同源蛋白1抗體 ?0.2ml
GDF6 英文名稱: 生長分化因子6抗體 ?0.2ml
GEFT 英文名稱: *核苷酸交換因子GEFT抗體 ?0.2ml
GMF beta 英文名稱: 膠漿成熟因子β抗體 ?0.2ml
GPR56 英文名稱: 蛋白偶聯受體56抗體 ?0.1ml
Gbx2 英文名稱: 腸和大腦特定同源蛋白2抗體 ?0.2mlPAP(Human Prostatic Acid Phosphatase) ELISA Kit 人前列腺酸磷酸酶 Multi-class antibodies 規格: 48T
PGDS(Human Prostaglandin D Synthase) ELISA Kit 人前列腺素D合成酶 Multi-class antibodies 規格: 48T
PG-C(Human Pepsinogen C) ELISA Kit 人*原C Multi-class antibodies 規格: 48T
PG-A(Human Pepsinogen A) ELISA Kit 人*原A Multi-class antibodies 規格: 48T
PLAUR/uPAR(Human Urokinase-type Plasminogen Activator Receptor) ELISA kit 人*型纖溶酶原激活物受體 Multi-class antibodies 規格: 48T
uPA(Human urokinase plasminogen activator) ELISA kit 人*型纖溶酶原激活物 Multi-class antibodies 規格: 48T
Tie-2(Human tyrosine kinase with immunoglobulin-like and EGF-like domains 2 ELISA Kit 人血管生成素受體/含免疫球蛋白樣環和上皮生長因子樣域*激酶2 Multi-class antibodies 規格: 48T
MMP-8(Human Matrix metalloproteinase 8/Neutrophil collagenase) ELISA kit 人基質金屬蛋白酶8/中粒細胞膠原酶 Multi-class antibodies 規格: 48T
(MMP-7(Human Matrix metalloproteinase 7) ELISA kit 人基質金屬蛋白酶7 Multi-class antibodies 規格: 48T
MMP-3(Human Matrix metalloproteinase 3) ELISA kit 人基質金屬蛋白酶3 Multi-class antibodies 規格: 48T
MMP-2/Gelatinase A(Human Matrix metalloproteinase 2/Gelatinase A) ELISA kit 人基質金屬蛋白酶2/明膠酶A Multi-class antibodies 規格: 48T
MMP-13(Human Matrix metalloproteinase 13) ELISA kit 人基質金屬蛋白酶13 Multi-class antibodies 規格: 48T