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人B淋巴母細胞；HMy2.CIR特性

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更新時間：2017-01-19 17:14:36瀏覽次數(shù)：235次

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產(chǎn)品簡介

人B淋巴母細胞；HMy2.CIR特性，質(zhì)量有保證、*、實驗效果好，同時我司為您提供價格、說明書、規(guī)格、用途、實驗原理等相關(guān)操作說明，歡迎前來選購！

詳細介紹

人B淋巴母細胞；HMy2.CIR特性來源可靠（源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等），活力>95%，貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業(yè)的實驗室，可無菌操作并提供相關(guān)科研項目解決方案以及實驗服務。

產(chǎn)品名稱	生長特性	發(fā)貨地	貨期
人B淋巴母細胞；HMy2.CIR特性	成纖維細胞樣	上海	3－5天

細胞名稱
形態(tài)特性   淋巴母細胞
生長特性懸浮生長
特征特性   ARH-77細胞株的快速生長突變株HMy.2 B用γ射線照射，選擇HLA I型抗原表達缺失的細胞，得到HMy2.CIR細胞株。這株細胞不表達HLA A位點和B位點的產(chǎn)物，但表達少量HLA Cw4。這株細胞適于用作I型主要組織相容性抗原基因的轉(zhuǎn)染宿主。有報道稱ARH-77細胞株呈EB核抗原陽性(EBNA+)和EB病毒莢膜抗原陽性(EBVCA+)。由于Hmy2.CIR細胞株起源于ARH-77細胞株的快速生長突變株HMy.2 B，推測它也是EBNA+。
培養(yǎng)條件   IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium  優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%
傳代方法   1:2。3天內(nèi)可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件   *培養(yǎng)基+8%DMSO
支原體檢測陰性
STR
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

細胞培養(yǎng)步驟：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：
1、準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2、培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液：90%*培養(yǎng)基，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
二、細胞處理：
1、復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤?0cm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：
1)棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細胞，1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄去半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細胞懸起，將細胞懸液按1：2到1：3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后加入少量*，細胞變圓脫落后，加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中，再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時，應將細胞收集，1000RPM條件下離心4分鐘，少量保存上清液（防止細胞吸走），加入部分新鮮培養(yǎng)基，加入到凍存管中，在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟：
1）貼壁細胞傳代：提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預熱，用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內(nèi)，吸除或倒掉細胞瓶內(nèi)舊培養(yǎng)液，加少量PBS潤洗細胞，加入適量*，使*的量能蓋住細胞，37℃孵育，每隔2~3min顯微鏡下觀察，待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*，加入新鮮培養(yǎng)基，晃動細胞瓶，終止*作用，用吸管小心吹打貼壁的細胞，制成細胞懸液。控制吹打的力度，避免產(chǎn)生大量的氣泡，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)，隔天觀察貼壁生長情況。
2）懸浮細胞傳代：將細胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi)，1000rpm離心5min，棄去上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，用吸管小心吹散沉淀，制成細胞懸液，將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內(nèi)，加入新鮮培養(yǎng)基，置37℃溫箱培養(yǎng)。
GGLT8D1   英文名稱：   糖基轉(zhuǎn)移酶8結(jié)構(gòu)域1抗體   ?0.2ml
Metabotropic Glutamate Receptor 2   英文名稱：   促代謝型*受體2抗體   ?0.1ml
GPKOW   英文名稱：   G蛋白修補結(jié)構(gòu)域蛋白5抗體   ?0.2ml
GCNT6   英文名稱：   β1-6 N-乙酰氨基葡萄糖轉(zhuǎn)移酶6抗體   ?0.2ml
Gibberellins   英文名稱：   牛磺酸/β-氨基乙磺酸抗體   ?0.1ml
Gibberellins   英文名稱：   赤霉素抗體   ?0.1ml
GNRPX   英文名稱：   *核苷酸結(jié)合蛋白X抗體   ?0.2ml
GRAMD2   英文名稱：   GRAM結(jié)構(gòu)域蛋白2抗體   ?0.2ml
GGTLC2   英文名稱：   γ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶輕鏈2抗體   ?0.2ml
PCDHGA1   英文名稱：   原鈣粘蛋白γA1抗體   ?0.2ml
GPR70   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體70抗體   ?0.2ml
GPR71   英文名稱：   G蛋白偶聯(lián)受體71抗體   ?0.2mlAAgtr I a(Human angiotensin II receptor type I a) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa型   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
ANGPTL3(Human angiopoietin-like protein 3) ELISA Kit 人血管生成素樣蛋白3   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
Alpha Actin(Human Alpha-Actin) ELISA Kit 人α肌動蛋白   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
ANKRD1(Human cardiac ankyrin repeat domain 1) ELISA Kit 人心肌錨蛋白重復域1   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
LEPR(Human Leptin Receptor) ELISA Kit 人瘦素受體   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
AT2R(Human Angiotensin II Receptor 2) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅱ受體2   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
ANG II R-1(Human angiotension II receptor 1) ELISA Kit 人血管緊張素Ⅱ受體1   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
ANG-4(Human Angiopoietin 4) ELISA Kit 人血管生成素4   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
sMHC-1(Human soluble myosin heavy chain 1) ELISA Kit 人可溶肌球蛋白重鏈1   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
HSF-1(Human Heat Shock Factor 1) ELISA Kit 人熱休克因子1   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
VPI(Human vasopeptidase inhibitors) ELISA Kit 人血管活肽酶抑制劑   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
CMLC-1(Human Cardiac myosin-light chains 1) ELISA Kit 人心肌肌凝蛋白輕鏈1   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T