【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞；NK-92 [NK92]培養
形態特性 淋巴母細胞
生長特性 懸浮生長
特征特性 NK-92是從一位患有急進性非霍奇金淋巴瘤的50歲白人男性外周血單核細胞衍生來的一株白細胞介素-2依賴型NK細胞株。 這株細胞對很多惡性細胞有細胞毒性；鉻釋放試驗顯示它能殺死K562和Daudi細胞。 NK-92細胞(經過照射以防止增殖)可以有效地用于血液中白血病的體外免疫清掃而不危及血細胞的功能。 NK-92細胞有以下特征： CD2, CD7, CD11a, CD28, CD45, CD54表面標記陽性，CD56亮；CD1, CD3, CD4, CD5, CD8, CD10, CD14, CD16, C
培養條件 α－MEM：Alpha Minimum Essential Medium (with Nucleosides) 優質胎牛血清，10%
傳代方法 1:2。3天內可長滿。
傳代情況 PN5
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞；NK-92 [NK92]培養復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續的實驗。
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞；NK-92 [NK92]培養操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
IMA(Human Ischemia Modified Albumin) ELISA Kit 人缺血修飾白蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
8-epi-PGF2 Alpha(Human 8-epi-prostaglandin F2alpha0 ELISA Kit 人8-異構前列腺素F2α Multi-class antibodies 規格： 48T
sVE-Cadherin (Human Vascular Endothelial-Cadherin Complex) ELISA Kit 人血管內皮鈣粘著蛋白復合體 Multi-class antibodies 規格： 48T
Alpha-SMA(Human Alpha-Smooth muscle actin) ELISA Kit 人α平滑肌肌動蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
Alpha-SCA(Human Alpha-sarcomeric actin) ELISA Kit 人α橫紋肌肌動蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
SMM(Human smooth muscle Myosin) ELISA Kit 人平滑肌肌球蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
c(Human cardiac isoform of Tropnin T) ELISA Kit 人心肌特異肌鈣蛋白T Multi-class antibodies 規格： 48T
MHC(Human myosin heavy chain) ELISA Kit 人肌球蛋白重鏈 Multi-class antibodies 規格： 48T
HSP-27(Human heat shock protein 27) ELISA Kit 人熱休克蛋白27 Multi-class antibodies 規格： 48T
ANG(Human angiostatin) ELISA Kit 人血管抑素/血管穩定蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48T
h-FABP(Human heart fatty acid binding protein) ELISA Kit 人心型脂肪酸結合蛋白 Multi-class antibodies 規格： 48TGRID2IP 英文名稱： *受體δ2/GluR-δ2抗體 ?0.2ml
Glycophorin A 英文名稱： 血型糖蛋白A/涎糖蛋白抗體 ?0.1ml
GAD67 英文名稱： *脫羧酶67抗體 ?0.1ml
GADD45 英文名稱： 生長抑制DNA損傷基因45抗體 ?0.1ml
GIP 英文名稱： 胃泌素抑制肽抗體 ?0.1ml
GLUT4 英文名稱： 葡萄糖轉運蛋白4抗體 ?0.1ml
glypican 3 英文名稱： 磷脂酰基醇蛋白聚糖-3抗體 ?0.1ml
Glucocorticoid receptor(GR) 英文名稱： 糖皮質激素受體抗體 ?0.1ml
人惡性非霍奇金淋巴瘤患者的自然殺傷細胞；NK-92 [NK92]培養GLP-1 (7-36) 英文名稱： 胰高血糖素樣肽-1抗體 ?0.1ml
GLUT3 英文名稱： 葡萄糖轉運蛋白3抗體 ?0.1ml
Gelsolin 英文名稱： 凝溶膠蛋白抗體 ?0.1ml
GHRH 英文名稱： 生長激素釋放激素抗體 ?0.1ml
G
