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人張氏肝細胞;Chang liver特性

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更新時間:2017-01-19 17:19:50瀏覽次數:272次

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產品簡介

人張氏肝細胞;Chang liver特性,質量有保證、*、實驗效果好,同時我司為您提供價格、說明書、規格、用途、實驗原理等相關操作說明,歡迎前來選購!

詳細介紹

產品名稱生長特性發貨地貨期
人張氏肝細胞;Chang liver特性成纖維細胞樣上海3-5天

細胞名稱  人張氏肝細胞;Chang liver特性
形態特性   上皮細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   張氏肝細胞1954年從非惡性的人體組織中建立。廣泛應用于病毒學、生化和惡性腫瘤相關的轉移研究。 
培養條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  胎牛血清,10%
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況  PN5
凍存條件   *培養基+8%DMSO
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  A類

來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
GPhospho-Glucocorticoid Receptor (Ser211)    英文名稱:    磷酸化糖皮質激素受體抗體    ?0.1ml
GPR158     英文名稱:    G蛋白偶聯受體GPR158蛋白抗體    ?0.2ml
Gamma catenin    英文名稱:    γ連環蛋白/Catenin γ /γ鏈接素抗體    ?0.2ml
GABARAPL2    英文名稱:    G1氨基丁酸A型受體相似蛋白2抗體    ?0.2ml
Gab1    英文名稱:    接頭蛋白Gab 1抗體    ?0.1ml
Phospho-GSK3 alpha (Ser21)    英文名稱:    磷酸化糖原合酶激酶3α抗體    ?0.1ml
phospho-GAP43 (Ser41)    英文名稱:    磷酸化神經生長相關蛋白43抗體    ?0.1ml
GSK-3 Beta (CT)    英文名稱:    糖原合酶激酶-3β抗體    ?0.1ml
GRGDS    英文名稱:    抗粘附多肽抗體    ?0.2ml
GLIPR1    英文名稱:    腦膠質瘤發病機制相關蛋白1抗體    ?0.2ml
GPM6A    英文名稱:    神經細胞膜糖蛋白M6a    ?0.2ml
GPR101    英文名稱:    G蛋白偶聯受體101抗體    ?0.2mlHANG(Human Angiogenin) ELISA Kit  人血管生長素    Multi-class antibodies    規格:     48T
ANG- II (Human angiotension II ) ELISA Kit  人血管緊張素Ⅱ    Multi-class antibodies    規格:     48T
Park2(Human Parkinson disease 2 parkin) ELISA Kit  人帕金森氏病2Parkin    Multi-class antibodies    規格:     48T
VCL(Human vinculin) ELISA Kit  人紐蛋白    Multi-class antibodies    規格:     48T
Ntn4(Human Netrin-4) ELISA Kit  人軸突生長誘向因子4    Multi-class antibodies    規格:     48T
Ntn1(Human Netrin-1) ELISA Kit  人軸突生長誘向因子1    Multi-class antibodies    規格:     48T
REG-4(Human regenerating gene IV ) ELISA Kit  人再生基因蛋白IV    Multi-class antibodies    規格:     48T
VS(Human versican/PG-M/PG-350) ELISA kit  人多功能蛋白聚糖    Multi-class antibodies    規格:     48T
Nfkbie(Human nuclear factor of kappa light polypeptide gene enhancer in B-cells inhibitor epsilon) KLISA Kit  人B細胞κ 輕肽基因增強子核因子抑制因子ε    Multi-class antibodies    規格:     48T

 

 


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