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黑人Burkitt淋巴瘤細胞；RAJI培養(yǎng)

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更新時間：2017-01-20 13:16:26瀏覽次數(shù)：291次

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產(chǎn)品簡介

黑人Burkitt淋巴瘤細胞；RAJI培養(yǎng)細胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養(yǎng)實驗室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細介紹

產(chǎn)品名稱	黑人Burkitt淋巴瘤細胞；RAJI培養(yǎng)
貨期	3－5天
發(fā)貨地	上海

細胞名稱 黑人Burkitt淋巴瘤細胞；RAJI培養(yǎng)
形態(tài)特性   淋巴母細胞樣
生長特性懸浮生長
特征特性   Raji細胞由Pulvertaft RJV于1963年從一位11歲黑人男孩的左上頜骨的Burkitt淋巴瘤中分離建立的，是*個人類造血系統(tǒng)的連續(xù)傳代細胞，為B細胞起源。該細胞中含有EBV，需要在*中操作；可作轉染宿主。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   維持細胞濃度在4×105/ml~3×106/ml；根據(jù)細胞濃度每2~3天補液1次。
傳代情況 C5
凍存條件   基礎培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測培養(yǎng)法（-）
STR   Amelogenin：X，Y；CSF1PO：10，12；D13S317：13；D16S539：8，11；D18S51：17；D19S433：14，14.2；D21S11：28，31；D2S1338：22；D3S1358：15，16；D5S818：10，13；D7S820：10；D8S1179：14，15；FGA：19，27；TH01：6，7；TPOX：8，13；vWA：16，19；
同工酶
染色體   43~48
使用權限 A類

復蘇操作要點：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養(yǎng)。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代，細胞活力恢復后才能進行后續(xù)的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中，將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
KCNC1   英文名稱：   離子通道蛋白Kv3.1抗體   ?0.1ml
KLK11   英文名稱：   *11抗體   ?0.1ml
Kappa Light Chain   英文名稱：   k輕鏈抗體   ?0.1ml
KIST   英文名稱：   */*蛋白激酶KIST抗體（激酶相互作用與白血病相關基因）   ?0.2ml
KIF5A/NKHC1   英文名稱：   驅動蛋白KIF5A抗體   ?0.2ml
KCC2   英文名稱：   神經(jīng)細胞鉀氯離子轉運蛋白抗體   ?0.1ml
KRAS   英文名稱：   原癌基因K-ras抗體   ?0.1ml
Kisspeptin   英文名稱：   腫瘤轉移抑制基因抗體   ?0.1ml
KLH   英文名稱：   血藍蛋白抗體   ?0.1ml
KCNG2   英文名稱：   心臟鉀離子通道蛋白亞基2抗體   ?0.2ml
KLHDC8A   英文名稱：   KLHDC8A蛋白抗體   ?0.2ml
Keratan Sulfate   英文名稱：   硫酸角質素抗體   ?0.2mlIL-1 Beta(Mouse Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 小鼠白介素1β   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
MYO/MB(Mouse Myoglobin) ELISA Kit 小鼠肌紅蛋白   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
TXB2(Mouse Thromboxane B2) ELISA Kit 小鼠血栓素B2   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
ACH(Mouse acetylcholine) ELISA Kit 小鼠乙酰*   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
LTB4(Mouse Leukotriene B4) ELISA Kit 小鼠白三烯B4   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
LIFR(Mouse leukemia inhibitory factor receptor) ELISA Kit 小鼠白血病抑制因子受體   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
PF/PFP(Mouse Perforin/Pore-forming protein) ELISA Kit 小鼠穿孔素   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
Synuclein mouse ELISA kit 小鼠突觸素   Multi-class antibodies   規(guī)格：   96T
mouse IgG ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
mouse IgM ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgM   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
mouse IgA ELISA kit 小鼠免疫球蛋白IgA   Multi-class antibodies   規(guī)格：   48T
IL-1 Beta (Rabbit Interleukin 1 Beta) ELISA Kit 兔白介素1β   Multi-class antibodies   規(guī)格：   96T