人胎盤絨膜癌細胞;BeWo特性來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞名稱 人胎盤絨膜癌細胞;BeWo特性
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 取自人絨癌腦轉移組織,在倉鼠頰囊移植傳代8年。利用移植瘤組織進行體外培養,建立細胞系。利用不同傳代方法建立了不同亞系,JEG-3是其衍生克隆。該細胞可以產生雌激素、孕激素、雌酮、雌二醇、雌三醇、hCG、胎盤催乳素、角蛋白。
培養條件 F12: Ham's F12 Nutrient Mixture 10%FBS
傳代方法 1:3傳代;3~4天換液1次。
傳代情況 C4
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:11,12;D13S317:9,11;D16S539:13,14;D18S51:14,16;D19S433:13,15;D21S11:30;D2S1338:21,24;D3S1358:15;D5S818:10,11;D7S820:10,12;D8S1179:12;FGA:22,23,24;TH01:9,9.3;TPOX:8;vWA:16;
同工酶
染色體 47~66
使用權限 A類
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
MAP3K4 英文名稱: 絲裂原活化蛋白激酶激酶激酶4抗體 ?0.2ml
NEUROD6 英文名稱: 神經細胞分化因子6抗體 ?0.2ml
MEIS2 英文名稱: 同源盒蛋白Meis2抗體 ?0.2ml
METRN 英文名稱: Meteorin神經膠質細胞分化調節蛋白抗體 ?0.2ml
MPP5 英文名稱: 棕櫚酰化膜蛋白5抗體 ?0.2ml
MPPED2 英文名稱: 腦蛋白239抗體 ?0.2ml
Meis homeobox 3 英文名稱: 同源盒蛋白MEIS3抗體 ?0.2ml
Myotrophin 英文名稱: 顆粒細胞分化蛋白抗體 ?0.2ml
Monoamine oxidase A+B 英文名稱: 單氨氧化酶A+B抗體 ?0.2ml
MIR16 英文名稱: 膜蛋白相互作用蛋白RGS16抗體 ?0.2ml
Matriptase 2 英文名稱: 膜型*蛋白酶2抗體 ?0.2ml
MRP8+MRP14 英文名稱: 多藥耐藥相關蛋白8/9/14抗體 ?0.2ml
MOBKL2B 英文名稱: Mob1同源蛋白MOBKL2B抗體 ?0.2mlAnti-phospho-c-Abl/v-abl(Tyr204) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-phospho-c-Abl/v-abl(Thr735) /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-phospho-c-Abl(Tyr89) /FITC 熒光素標記兔抗人、小鼠磷酸化非受體*激酶c-Abl抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-Phospho-HDAC3 (Ser424)/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠磷酸化組蛋白去乙酰化酶3抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CAD/CPAN/FITC 熒光素標記Caspase 激活的脫氧核糖核酸酶抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CA I/FITC 熒光素標記碳酸酐酶1抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CA II /FITC 熒光素標記碳酸酐酶2抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-Calcineurin Alpha /PP-2B alpha 1 /FITC 熒光素標記蛋白磷酸酯酶-2B催化亞單位抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-caldesmon/smooth muscle /FITC 熒光素標記鈣調結合蛋白/鈣調素結合蛋白抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-p-Caldesmon/FITC 熒光素標記磷酸化鈣介質素抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-Smoothened/SMOH /FITC 熒光素標記跨膜蛋白Smoothened抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-Calpain 1/FITC 熒光素標記鈣蛋白酶抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
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