人惡性黑色素瘤細胞;A-375 [A375]復蘇 來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞名稱 人惡性黑色素瘤細胞;A-375 [A375]復蘇
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 A375源自一位54歲女性,是Giard DJ等人建立的一系列細胞株中的一株。該細胞可在免疫抑制小鼠上成瘤,在瓊脂上形成克隆。
培養條件 DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose) 10%FBS;1mM丙酮酸鈉+4mML-Glutamine
傳代方法 1:3~1:8傳代;2~3天換液1次。
傳代情況 P172
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:11,12;D13S317:11,14;D16S539:9;D18S51:12,17;D19S433:13,14.2;D21S11:29,30;D2S1338:16;D3S1358:15,17;D5S818:12;D7S820:9;D8S1179:11,14;FGA:23;TH01:8;TPOX:8,10;vWA:16,17;
同工酶
染色體 61~64
使用權限 A類
產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
人惡性黑色素瘤細胞;A-375 [A375]復蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
人惡性黑色素瘤細胞;A-375 [A375]復蘇 細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人惡性黑色素瘤細胞;A-375 [A375]復蘇 操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
? Anti-CBX3/FITC 熒光素標記染色盒同源物3抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CBX5/FITC 熒光素標記CBX5抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-Cbx8/FITC 熒光素標記染色質結合蛋白Cbx8抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CC16/FITC 熒光素標記克拉拉細胞蛋白(Clara細胞分泌蛋白)抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCK8/FITC 熒光素標記膽囊收縮素/縮膽囊素抗體(八肽) Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCL1/I-309/TCA3/FITC 熒光素標記嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL1抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCL3/MIP-1 Alpha/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎蛋白1α抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCL4/MIP-1 Beta/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎蛋白1β抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCL5/RANTES/FITC 熒光素標記調節活化的正常T細胞表達和分泌的因子IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCL6/C10/FITC 熒光素標記嗜酸粒細胞趨化蛋白CCL6抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCL9/CCL10/MIP-1 Gamma/FITC 熒光素標記巨噬細胞炎癥蛋白-1γ抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2mlMEK4 英文名稱: 絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體 ?0.1ml
Myozenin 1 英文名稱: MYOZ抗體 ?0.2ml
MCP-2 英文名稱: 單核細胞趨化蛋白2抗體 ?0.2ml
METTL11A 英文名稱: 甲基化樣蛋白11抗體(N端) ?0.1ml
MCC 英文名稱: 大腸癌腫瘤突變蛋白抗體 ?0.2ml
MARK4 英文名稱: */*蛋白激酶MARK4抗體 ?0.1ml
人惡性黑色素瘤細胞;A-375 [A375]復蘇 MEP1A 英文名稱: 苯甲酸肽水解酶抗體 ?0.1ml
phospho-MEK2(Thr394) 英文名稱: 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶2抗體 ?0.1ml
phospho-MEK3(Thr222) 英文名稱: 磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶3抗體 ?0.1ml
MEK5 英文名稱: 絲裂原活化蛋白激酶激酶5抗體 ?0.1ml