產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
人紅系白血病細胞;TF-1特性 | 懸浮生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 人紅系白血病細胞;TF-1特性
形態特性 淋巴母細胞樣
生長特性 懸浮生長
特征特性 該細胞系1987年由Kitamura T等建立,源于一名35歲日本男性的肝素化骨髓抽取樣本,該患者具有嚴重的全血細胞減少癥。細胞生長*依賴于IL-3或GM-CSF,對IL-5無反應。多種淋巴因子和細胞因子對該細胞都有作用,如:IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。該細胞不表達血型糖蛋白A和碳酸酐酶I。由該細胞的形態和細胞化學特征及珠蛋白基因的組成性表達,顯示該細胞屬于紅系。氯高鐵血紅素和δ氨基乙酰丙酸誘導細胞合成血紅蛋白,TPA刺激細胞向巨噬細胞樣細胞分
培養條件 RPMI 1640 (w/o Hepes) 10%FBS;4mM glutamine
傳代方法 維持細胞濃度在3×104~5×105 cells/ml;2~3天換液1次。
傳代情況 C6
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X,Y;CSF1PO:12,13;D13S317:8,9;D16S539:9,12;D18S51:13;D19S433:14,16;D21S11:30;D2S1338:19;D3S1358:15;D5S818:13;D7S820:12;D8S1179:11,15;FGA:18,19;TH01:7,9;TPOX:8;vWA:15,17;
同工酶
染色體 78~104
使用權限 A類
來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
蘇操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液??刂拼荡虻牧Χ?,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
Anti-ABCD1/MDC(small inducible cytokine A22 precursor)/FITC 熒光素標記抗嗜酸粒細胞趨化蛋白2抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCL23/MPIF-1/FITC 熒光素標記骨髓抑制因子1抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCL24/Eotaxin-2/FITC 熒光素標記嗜酸粒細胞趨化蛋白24抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCL27/CTACK/FITC 熒光素標記皮膚T細胞虜獲趨化因子抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCL26/FITC 熒光素標記抗嗜酸粒細胞趨化蛋白3抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCL28/FITC 熒光素標記粘膜相關上皮趨化因子MEC抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCP/FITC 熒光素標記兔抗瓜氨酸環肽抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCR-1/FITC 熒光素標記趨化因子受體1抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCR-2/5/FITC 熒光素標記CC趨化因子受體2/5抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CCR-2A/FITC 熒光素標記細胞表面趨化因子受體2A抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2mlMPP2 英文名稱: MPP2蛋白抗體 ?0.1ml
MS4A14 英文名稱: 發育相關蛋白抗體 ?0.1ml
MS4A15 英文名稱: MS4A15蛋白抗體 ?0.1ml
MS4A6A 英文名稱: 四度跨膜蛋白3抗體 ?0.1ml
MAGEA12 英文名稱: 黑色素瘤相關抗原12抗體 ?0.2ml
MAGEA2 英文名稱: 黑色素瘤相關抗原2抗體 ?0.2ml
MAGEA5 英文名稱: 黑色素瘤相關抗原5抗體 ?0.2ml
Msx2 英文名稱: 同源盒基因Msx2抗體 ?0.2ml