產品名稱 | 生長特性 | 發貨地 | 貨期 |
人結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]復蘇 | 貼壁生長 | 上海 | 3-5天 |
細胞名稱 人結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]復蘇
形態特性 上皮樣
生長特性 貼壁生長
特征特性 SW480源自一位51歲白人男性患者的原位直腸腺癌,而SW620源自同一病人一年后的淋巴結轉移灶。 該細胞CSAp和直腸抗原3陰性;角蛋白陽性;p53基因第273位密碼子的G →A突變引起Arg→His替代,309位密碼子的C→T突變導致Pro→Ser替代;細胞p53蛋白表達水平升高;癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis 和fos的表達呈陽性;未檢測到癌基因N-myc的表達;不表達Matrilysin(一種與腫瘤侵襲相關的金屬蛋白酶)。有報道稱該細胞表達GM-CSF。ras
培養條件 IMDM: Iscove's Modiefied Dulbecco's Medium 10%FBS
傳代方法 1:2~1:8傳代;1~2天換液1次。
傳代情況 C4
凍存條件 基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測 培養法(-)
STR Amelogenin:X;CSF1PO:13,14;D13S317:12;D16S539:13;D18S51:13;D19S433:13;D21S11:30,30.2;D2S1338:17,24;D3S1358:15;D5S818:13;D7S820:8;D8S1179:13;FGA:24;TH01:8;TPOX:11;vWA:16;
同工酶
染色體 51~57
使用權限 A類
人結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]復蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細胞、新鮮原代細胞、原代細胞的分子學實驗等提供全程服務。我司擁有專業的實驗室,可無菌操作并提供相關科研項目解決方案以及實驗服務。
人結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]復蘇細胞培養步驟:
一.培養基及培養凍存條件準備:
1、準備RPMI-1640培養基(RPMI-1640:GIBCO,貨號31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優質胎牛血清,10%。
2、培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二、細胞處理:
1、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。第二天換液并檢查細胞密度。
2、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。
4)將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數換液方式,棄去半數培養基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。
3、細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量*,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。懸浮細胞凍存時,應將細胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細胞吸走),加入部分新鮮培養基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進行凍存。
人結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]復蘇操作步驟:
1)貼壁細胞傳代:提前將培養基、PBS放入37℃水浴鍋內預熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺內,吸除或倒掉細胞瓶內舊培養液,加少量PBS潤洗細胞,加入適量*,使*的量能蓋住細胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細胞間間隙變大、細胞趨于圓形但還未漂起時棄去*,加入新鮮培養基,晃動細胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細胞,制成細胞懸液。控制吹打的力度,避免產生大量的氣泡,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養,隔天觀察貼壁生長情況。
2)懸浮細胞傳代:將細胞懸液轉移到無菌離心管內,1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養基,用吸管小心吹散沉淀,制成細胞懸液,將細胞懸液分別接種到另外的2~3個細胞瓶內,加入新鮮培養基,置37℃溫箱培養。
Anti-CD33/FITC 熒光素標記抗CD33抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CD33L/OBBP1/FITC 熒光素標記兔CD33L抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CD34/FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠、兔、牛、豬、犬CD34抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CD34(C-term) /FITC 熒光素標記CD34抗體(細胞表面的唾液粘蛋白)C端蛋白多肽IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-Anti-CD44v10 /FITC 熒光素標記兔抗人、大、小鼠CD44V10抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CD34/PE 熒光素PE標記CD34抗體(細胞表面的唾液粘蛋白)IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CR1/CD35/FITC 熒光素標記Ⅰ型補體受體抗體(C3b/C4b受體抗體)IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CD36/FITC 熒光素標記CD36抗體IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2ml
Anti-CD38(human)/FITC 熒光素標記抗CD38抗體(人)IgG Multi-class antibodies 規格: 0.2mlMPhospho-Mst1(Thr183) 英文名稱: 磷酸化蛋白激酶MST1抗體 ?0.1ml
MRP9 英文名稱: 多藥耐藥相關蛋白9抗體 ?0.2ml
MMP-2 英文名稱: 基質金屬蛋白酶-2抗體 ?0.1ml
MMP-2 英文名稱: 基質金屬蛋白酶2抗體 ?0.1ml
Mad2L1 英文名稱: 有絲分裂阻滯缺陷2樣蛋白1抗體 ?0.2ml
MAD2 英文名稱: 有絲分裂阻滯缺陷蛋白2抗體 ?0.2ml
beta 2 Microglobulin 英文名稱: β2微球蛋白抗體 ?0.1ml
phospho-MCK10 (Tyr513) 英文名稱: 磷酸化神經上皮*激酶/癌激酶10抗體 ?0.1ml
人結直腸腺癌細胞;SW480 [SW 480;SW-480]復蘇MMS21 英文名稱: E3連接酶MMS21蛋白抗體 ?0.2ml
MID2/RNF60/Midline-2 英文名稱: 環指蛋白60抗體 ?0.2ml
MYL7 英文名稱: 肌球蛋白輕鏈7抗體 ?0.2ml