當(dāng)前位置：上海撫生實(shí)業(yè)有限公司>>ATCC細(xì)胞>>腫瘤細(xì)胞>>人食管癌細(xì)胞；EC109使用說明書

人食管癌細(xì)胞；EC109使用說明書

返回列表頁

參考價(jià)

面議

具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)

產(chǎn)品型號(hào)

品牌

廠商性質(zhì)代理商

所在地上海市

在線詢價(jià) 收藏產(chǎn)品查看聯(lián)系電話

聯(lián)系方式：劉夢(mèng)查看聯(lián)系方式

更新時(shí)間：2017-01-20 15:12:09瀏覽次數(shù)：152次

聯(lián)系我時(shí)，請(qǐng)告知來自智慧城市網(wǎng)

產(chǎn)品分類 品牌分類

  ATCC細(xì)胞

兔源細(xì)胞

犬源細(xì)胞

貓?jiān)醇?xì)胞

豚鼠源細(xì)胞

倉鼠源細(xì)胞

大鼠源細(xì)胞

小鼠源細(xì)胞

腫瘤細(xì)胞

轉(zhuǎn)化細(xì)胞

人正常組織來源細(xì)胞

全部產(chǎn)品列表

暫無信息

上海撫生實(shí)業(yè)有限公司

經(jīng)營模式：代理商

商鋪產(chǎn)品：9963條

所在地區(qū)：上海上海市

聯(lián)系人：劉夢(mèng) （銷售員）

詢價(jià) 給他留言

產(chǎn)品簡介

人食管癌細(xì)胞；EC109使用說明書細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱 人食管癌細(xì)胞；EC109使用說明書
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性貼壁生長
特征特性   1973年建系，來自人食管中段鱗癌組織，小塊法原代培養(yǎng)建系。BALB/c裸鼠移植成瘤。
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代；2~3天1次。
傳代情況 C3
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè) 培養(yǎng)法（-）
STR   Amelogenin：X；CSF1PO：10；D13S317：11；D16S539：12；D18S51：12，16；D19S433：13；D21S11：30；D2S1338：17，20；D3S1358：17；D5S818：12；D7S820：8，12；D8S1179：13，14；FGA：25；TH01：9；TPOX：8；vWA：16，17；
同工酶
染色體
使用權(quán)限 A類

產(chǎn)品名稱	人食管癌細(xì)胞；EC109使用說明書
貨期	3－5天
發(fā)貨地	上海

復(fù)蘇操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
NG2   英文名稱：   黑色素瘤*蛋白多糖抗體   ?0.1ml
Nucleoprotein TPR   英文名稱：   核蛋白易位啟動(dòng)子區(qū)域TPR抗體   ?0.2ml
NFIX   英文名稱：   核因子1X抗體   ?0.2ml
NIRF    英文名稱：   環(huán)指蛋白107抗體   ?0.2ml
Netrin G1 ligand   英文名稱：   軸突生長誘向因子G1配體抗體   ?0.2ml
NEDD5   英文名稱：   神經(jīng)前體細(xì)胞表達(dá)發(fā)育下調(diào)蛋白5抗體   ?0.1ml
Netrin 4   英文名稱：   軸突生長誘向因子4抗體   ?0.1ml
Nicalin   英文名稱：   γ-分泌酶組件蛋白NCLN抗體   ?0.2ml
NR2E3   英文名稱：   核受體蛋白NR2E3抗體   ?0.2ml
NEK8   英文名稱：   */*蛋白激酶NEK8抗體   ?0.2mlnti-Phospho-Doublecortin (Ser297) /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠等磷酸化雙皮質(zhì)素抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-D-DIMER/FITC 熒光素標(biāo)記交聯(lián)纖維蛋白二聚體抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-DDAH-II /FITC 熒光素標(biāo)記雙甲基*水解酶2抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-DDB1/FITC 熒光素標(biāo)記損傷DNA結(jié)合蛋白1抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-DDB2/FITC 熒光素標(biāo)記損傷DNA結(jié)合蛋白2抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-DDC/FITC 熒光素標(biāo)記多巴胺脫羧酶抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-DEC-205/CD205/Ly75/FITC 熒光素標(biāo)記CD205抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Dectin-1/CLECSF12/FITC 熒光素標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族7成員A抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Dectin-2/CLECSF10/CLEC6A/FITC 熒光素標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族6成員A抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Dectin-1/CLECSF12/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記C型凝集素結(jié)構(gòu)域家族7成員A抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-DDX4/MVH/FITC 熒光素標(biāo)記DDX4抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Defensin Beta1/FITC 熒光素標(biāo)記防御素β1抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml
Anti-Defensin Beta2/beta-defensin 2/BD-2(mouse) /FITC 熒光素標(biāo)記防御素β2抗體IgG   Multi-class antibodies   規(guī)格：   0.2ml