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人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞；HO-8910PM使用說明書

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所  在  地上海市

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更新時間：2017-01-20 21:18:34瀏覽次數(shù)：276次

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產(chǎn)品簡介

人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞；HO-8910PM使用說明書細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實驗室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱  人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞；HO-8910PM使用說明書
形態(tài)特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   是來源于HO-8910的高轉(zhuǎn)移亞系。STR檢測發(fā)現(xiàn)SGC7901、SMMC7721、QGY7701、QGY7703、QSG7701、Ho-8910PM、Ho-8910、BEL7402、SMMC7721等多株細(xì)胞為同一遺傳背景，懷疑彼此間存在交叉污染。 
培養(yǎng)條件   RPMI 1640 (w/o Hepes)  10%FBS
傳代方法   1:3~1:4傳代，2~3天1次。
傳代情況  不詳
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  培養(yǎng)法（-）
STR   Amelogenin：X；CSF1PO：10；D13S317：13.3；D16S539：9，10；D18S51：16；D19S433：13；D21S11：27，28；D2S1338：17；D3S1358：15，18；D5S818：12；D7S820：12；D8S1179：12；FGA：18，21；TH01：7；TPOX：12；vWA：16，17，18；
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  A類

產(chǎn)品名稱人高轉(zhuǎn)移卵巢癌細(xì)胞；HO-8910PM使用說明書
貨期3－5天
發(fā)貨地上海

復(fù)蘇操作要點： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。 
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶內(nèi)，補加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實驗。
操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
4-溴吡啶-2-羧酸    CAS號：    30766-03-1    說明書
5-溴-2-吡啶羧酸    CAS號：    30766-11-1    報價
羥甲基膦酸二乙酯    CAS號：    3084-40-0    進(jìn)口、國產(chǎn)
2-氰基-5-溴甲基吡啶    CAS號：    308846-06-2    現(xiàn)貨供應(yīng)
2-溴-9-芴酮    CAS號：    3096-56-8    說明書
N-叔丁氧羰基-2-甲基*    CAS號：    30992-29-1    報價
3-氯甲基吡啶    CAS號：    3099-31-8    進(jìn)口、國產(chǎn)
(R)-3-Boc-氨基哌啶    CAS號：    309956-78-3    現(xiàn)貨供應(yīng)
L-2-哌啶酸    CAS號：    3105-95-1    說明書
3，5-吡唑二甲酸    CAS號：    3112-31-0    報價
四丁基溴化    CAS號：    3115-68-2    進(jìn)口、國產(chǎn)
芐基-1-碳酸酯    CAS號：    31166-44-6    現(xiàn)貨供應(yīng)人強(qiáng)啡肽(Dyn)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人潛伏膜蛋白1(LMP-1)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人前胰淀粉樣蛋白（proIAPP）ELISA試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人前心鈉肽(Pro-ANP)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人前鐵調(diào)素（Pro-Hepcidin）ELISA試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人前列腺特異性抗原(PSA)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人前列腺特異膜抗原(PSMA)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人前列腺酸性磷酸酶(PAP)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人前列腺素F2α(PGF2α)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人前列腺素F(PGF)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人前列腺素E2(PGE2)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝
人前列腺素E1(PGE1)ELISA 試劑盒    96T/48T    試劑盒    組裝/原裝

 

 


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