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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司


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雜交瘤細(xì)胞株；11F11E4使用說(shuō)明書(shū)

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所  在  地上海市

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更新時(shí)間：2017-02-09 10:05:39瀏覽次數(shù)：170次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

雜交瘤細(xì)胞株；11F11E4使用說(shuō)明書(shū)細(xì)胞一般2-3天更換一次培養(yǎng)基，這取決于細(xì)胞生長(zhǎng)的速度。許多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)室通常在周一，周三，周五更換培養(yǎng)基。

詳細(xì)介紹

【溫馨提示】細(xì)胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。

細(xì)胞名稱  雜交瘤細(xì)胞株；11F11E4使用說(shuō)明書(shū)
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性  懸浮生長(zhǎng)
特征特性   該細(xì)胞屬保藏，其特征特性尚未公開(kāi)。 
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代，3-4天傳1次
傳代情況  C5
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  未定

產(chǎn)品名稱雜交瘤細(xì)胞株；11F11E4使用說(shuō)明書(shū)
貨期3－5天
發(fā)貨地上海

復(fù)蘇操作要點(diǎn)： 
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無(wú)菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。 
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)*解凍，使細(xì)胞能盡快通過(guò)zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒(méi)入水中，BIU-87(人膀胱癌細(xì)胞)避免引起污染。 
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。 
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。 
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。 
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合
操作步驟：
1. 將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中，將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片，待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育：按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染：用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍(lán)。
10. 封片：將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè)，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè)，以免產(chǎn)生氣泡，封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
2-Hydroxy-1-naphthoic acid    2-萘酚-1-羧酸    250毫克    超純，99%
2-Hexanone    丙基丙酮    25克    CP，99.5%
2'-Fluoroacetophenone    鄰氟苯乙酮    500克    CP，98%
2-FDU    2'-脫氧-2'-氟尿苷    5克    特純，99%
2-FDC    2'-脫氧-2-氟胞苷    25克    特純，98.5%
2-Ethylhexanoic acid    2-乙基次羊脂酸    1克    標(biāo)準(zhǔn)液，特純，99%
2-Ethyl-1-butanol    2-乙基丁醇    25克    高純，99%
2-Ethoxybenzoyl chloride    2-乙氧基苯甲酰氯    100克    AR
2-dT    β-脫氧胸腺核苷    25毫克    植物細(xì)胞培養(yǎng)級(jí)，99%牛干擾素-tau ELISA Kit    ，英文名：    Bovine Interferon-Tau ELISA Kit    ，規(guī)格：    48T/96T
牛附睪分泌蛋白E1(NPC2)ELISA Kit    ，英文名：    Bovine Epididymal secretory protein E1,NPC2 ELISA kit    ，規(guī)格：    48T/96T
牛分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA Kit    ，英文名：    Bovine secretory immunoglobulin A,sIgA ELISA Kit    ，規(guī)格：    48T/96T
牛肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白C(SP-C)ELISA Kit    ，英文名：    Bovine pulmonary surfactant-associated protein C,SP-C ELISA Kit    ，規(guī)格：    48T/96T
牛*釋放激素(GnRH)ELISA Kit    ，英文名：    Bovine gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit    ，規(guī)格：    48T/96T
牛促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)ELISA Kit    ，英文名：    Bovine adrenocorticotropic hormone,ACTH ELISA kit    ，規(guī)格：    48T/96T
牛促卵泡素(FSH)ELISA Kit    ，英文名：    Bovine follicle-stimulating hormone,FSH ELISA Kit    ，規(guī)格：    48T/96T
牛促甲狀腺素(TSH)ELISA Kit    ，英文名：    Bovine Thyroid Stimulating Hormone,TSH ELISA Kit    ，規(guī)格：    48T/96T
牛雌酮(E1)ELISA Kit    ，英文名：    Bovine estrone,E1 ELISA kit    ，規(guī)格：    48T/96T
牛雌三醇(E3)ELISA Kit    ，英文名：    Bovine Estriol,E3 ELISA Kit    ，規(guī)格：    48T/96T

 

 

 


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