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上海撫生實(shí)業(yè)有限公司


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雜交瘤細(xì)胞株;F9-M-01復(fù)蘇

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更新時(shí)間:2017-02-10 08:54:21瀏覽次數(shù):100次

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產(chǎn)品簡(jiǎn)介

雜交瘤細(xì)胞株;F9-M-01復(fù)蘇現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、*、實(shí)驗(yàn)效果好,同時(shí)我司為您提供價(jià)格、說明書、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說明,歡迎前來選購!

詳細(xì)介紹

雜交瘤細(xì)胞株;F9-M-01復(fù)蘇來源可靠(源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等),活力>95%,貼壁性好。我們從試劑、包被器皿、凍存原代細(xì)胞、新鮮原代細(xì)胞、原代細(xì)胞的分子學(xué)實(shí)驗(yàn)等提供全程服務(wù)。我司擁有專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室,可無菌操作并提供相關(guān)科研項(xiàng)目解決方案以及實(shí)驗(yàn)服務(wù)。

產(chǎn)品名稱生長(zhǎng)特性發(fā)貨地貨期
雜交瘤細(xì)胞株;F9-M-01復(fù)蘇懸浮生長(zhǎng)上海3-5天

細(xì)胞名稱  
形態(tài)特性   淋巴母細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性  懸浮生長(zhǎng)
特征特性   該細(xì)胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養(yǎng)條件   MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts)  10%FBS
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況  C5
凍存條件   基礎(chǔ)培養(yǎng)基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測(cè)  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權(quán)限  未定

細(xì)胞培養(yǎng)步驟:
一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
1、準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號(hào)31800022, 添加NaHCO3 1.5g/L, D-葡萄糖2.5g/L, 丙酮酸鈉 0.11g/L),90%;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%。
2、培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3、凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲(chǔ)存。
二、細(xì)胞處理:
1、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1)棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2)加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
3)按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4)將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量*,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。懸浮細(xì)胞凍存時(shí),應(yīng)將細(xì)胞收集,1000RPM條件下離心4分鐘,少量保存上清液(防止細(xì)胞吸走),加入部分新鮮培養(yǎng)基,加入到凍存管中,在凍存管中加入10%DMSO后進(jìn)行凍存。
操作步驟:
1)貼壁細(xì)胞傳代:提前將培養(yǎng)基、PBS放入37℃水浴鍋內(nèi)預(yù)熱,用75%酒精擦拭后再放入超凈臺(tái)內(nèi),吸除或倒掉細(xì)胞瓶?jī)?nèi)舊培養(yǎng)液,加少量PBS潤(rùn)洗細(xì)胞,加入適量*,使*的量能蓋住細(xì)胞,37℃孵育,每隔2~3min顯微鏡下觀察,待貼壁細(xì)胞間間隙變大、細(xì)胞趨于圓形但還未漂起時(shí)棄去*,加入新鮮培養(yǎng)基,晃動(dòng)細(xì)胞瓶,終止*作用,用吸管小心吹打貼壁的細(xì)胞,制成細(xì)胞懸液。控制吹打的力度,避免產(chǎn)生大量的氣泡,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng),隔天觀察貼壁生長(zhǎng)情況。
2)懸浮細(xì)胞傳代:將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到無菌離心管內(nèi),1000rpm離心5min,棄去上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,用吸管小心吹散沉淀,制成細(xì)胞懸液,將細(xì)胞懸液分別接種到另外的2~3個(gè)細(xì)胞瓶?jī)?nèi),加入新鮮培養(yǎng)基,置37℃溫箱培養(yǎng)。
小鼠*原片段F1+2(F1+2)免疫試劑盒    Mouse prothrombin fragment 1+2,F1+2 ELISA Kit
小鼠*受體(TR)免疫試劑盒    Mouse thrombin receptor,TR ELISA Kit
小鼠輪狀病毒(RV)抗原(Ag)免疫試劑盒    Human rotavirus(RV)antigen(Ag)ELISA kit
小鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)免疫試劑盒    Mouse Ovalbumin Specific IgG,OVA sIgG ELISA Kit
小鼠卵清蛋白特異性IgE(OVA sIgE)免疫試劑盒    Mouse ovalbumin specific IgE,OVA sIgE ELISA Kit
小鼠卵泡抑素(FS)免疫試劑盒    Mouse Follistatin,FS ELISA Kit
小鼠硫脂(SULF)抗體免疫試劑盒    Mouse sulfatide(SULF)antibody ELISA kit
小鼠硫氧化還原蛋白(Trx)免疫試劑盒    Mouse Thioredoxin,Trx ELISA Kit
小鼠流行性乙型腦炎(JE)抗體(IgG)免疫試劑盒    Mouse Japanese Encephalitis(JE)Antibody(IgG)ELISA Kit硅膠60熒光薄層層析玻璃板    shēng huà shì jì    容量:     保存-20℃    5KU
*還原酶測(cè)試盒    shēng huà shì jì    容量:    RT    5套/盒
*還原酶    shēng huà shì jì    容量:    RT    5克
*過氧化物酶    shēng huà shì jì    容量:        25克
谷草轉(zhuǎn)氨酶測(cè)試盒    shēng huà shì jì    容量:        10個(gè)
*盒    shēng huà shì jì    容量:    RT    10個(gè)
*轉(zhuǎn)移酶    shēng huà shì jì    容量:    2~8℃,避光    5克
*合成酶測(cè)試盒    shēng huà shì jì    容量:    RT    200支/包
鉻酸銫    shēng huà shì jì    容量:    RT,避光    5克
鉻酸鉛    shēng huà shì jì    容量:        25克

 

 

 


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