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中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24培養

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品       牌

廠商性質代理商

所  在  地上海

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更新時間:2017-02-13 10:09:36瀏覽次數:344次

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產品簡介

中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24培養細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細胞名稱  中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24培養
形態特性   上皮樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   CHO細胞以人CTLA-4基因細胞外結構域序列和人IgCgamma1的絞鏈區,CH2和CH#區序列的融合結構轉染,構建了這株細胞。它們表達融合蛋白(CTLA4Ig)。 
培養條件   DMEM-H: Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DME H-21 4.5g/Liter Glucose)  優質胎牛血清,10%;0.2 mM *,0.001 mM氨甲蝶呤
傳代方法   消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況  PN5
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  B類

產品名稱中國倉鼠卵巢細胞;CTLA4 Ig-24培養
貨期3-5天
發貨地上海

復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
人高鐵血紅蛋白(MHB)免疫試劑盒    Human Methemoglobin,MHB ELISA Kit
人高糖基化人絨毛膜*(hCG)免疫試劑盒    Human hCG ELISA Kit
人高敏三碘甲狀腺原氨酸(u-T3)免疫試劑盒    Human Ultrasensitivity Tri-iodothyronine,u-T3 ELISA Kit
人高敏甲狀腺素(u-T4)免疫試劑盒    human Ultrasensitivity Thyroxine,u-T4 ELISA Kit
人高密度脂蛋白*(HDL-C)免疫試劑盒    Human High density lipoprotein cholesterol,HDL-C ELISA Kit
人高密度脂蛋白3(HDL3)免疫試劑盒    Human high density lipoprotein 3,HDL3 ELISA Kit
人高密度脂蛋白2(HDL2)免疫試劑盒    Human High density lipoprotein 2,HDL2 ELISA Kit分散黃9    DISPERSE YELLOW 9    6373-73-5
分子篩4A型    MOLECULAR SIEVES PACK 4A    70955-01-0
分子篩13X型    MOLECULAR SIEVE    63231-69-6
酚番紅花紅    CI 50200    81-93-6
* 絡合指示劑    PHENOLPHTHALEIN COMPLEXONE    25296-54-2
蜂蠟    BEESWAX    8012-89-3
硅酸鎂載體    Magnesium silicate    1343-88-0
佛手油    NA    
呋喃(*)    Furan    110-00-9
呋喃-2-硼酸    2-Furanboronic acid    13331-23-2

 

 


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