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中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/使用說明書

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更新時間:2017-02-13 10:33:01瀏覽次數:565次

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產品簡介

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6使用說明書細胞一般2-3天更換一次培養基,這取決于細胞生長的速度。許多細胞培養實驗室通常在周一,周三,周五更換培養基。

詳細介紹

【溫馨提示】細胞用途:只可用于科研,不可用于臨床診斷和治療

細胞名稱  中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6使用說明書
形態特性   上皮細胞樣
生長特性  貼壁生長
特征特性   該細胞屬保藏,其特征特性尚未公開。 
培養條件   DMEM/F12(1:1): Ham's F12/DME Medium (DME H-16/F-12 50% Mixture w/o HEPES, with NEAA Medium) 10%FBS
傳代方法   1:3傳代,3-4天傳1次
傳代情況  C10
凍存條件   基礎培養基+5%DMSO+20%FBS
支原體檢測  陰性
STR  
同工酶  
染色體  
使用權限  未定

產品名稱中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6使用說明書
貨期3-5天
發貨地上海

中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6使用說明書復蘇操作要點: 
1)將培養基在37℃水浴鍋預熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預熱培養基。 
2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內,再逐步轉移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內*解凍,使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。 
3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內,將管內細胞轉移至準備好的離心管內,輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次,均轉移至離心管內。 
4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養基,吹打制成細胞懸液。 
5)將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內,補加適量的培養基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內培養。 
6)第二天觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養,待細胞長至80~90%匯合
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6使用說明書操作步驟:
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中,將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
緩沖液PH=4    NA    
緩沖液PH=7    NA    
黃苷    XANTHOSINE DIHYDRATE    5968-90-1
黃嘌呤氧化酶(+4℃)    EC 1.1.3.22    9002-17-9
* G2(+4℃)    AFLATOXIN G2    7241-98-7
* G1(+4℃)    AFLATOXIN G1    1165-39-5
黃素腺嘌呤二核苷酸(-20℃)    Flavin adenine dinucleotide disodium salt    84366-81-4
素(易制毒-1)    Safrole    94-59-7
煌綠瓊脂    NA    
煌綠乳糖膽鹽肉湯    Brilliant Green Lactose Bile Broth    
*鈉鹽    Sodium sulfadiazine    547-32-0
磺基*    Sodium sulfosalicylate    1300-64-1人凋亡抑制因3(BIRC4/API3)免疫試劑盒    Human BIRC4 ELISA kit
人凋亡相關蛋白激酶(DAPK)免疫試劑盒    Human DAPK ELISA Kit
人凋亡相關半*肽酶4(Casp4)免疫試劑盒    human caspase 4-apoptosis-related cysteine peptidase,Casp4 ELISA Kit
人凋亡蛋白酶激活因1(APAF1)免疫試劑盒    Human apoptosis protease activating factor-1,Apaf-1 ELISA Kit
中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6使用說明書人淀粉狀蛋白β(A4)前體蛋白結合家族B成員1(FE65)免疫試劑盒    Human FE65 ELISA kit
人電轉運黃素蛋白-泛醌氧化還原酶/電轉運黃素蛋白脫氫酶(ETFDH)免疫試劑盒    Human ETFDH ELISA kit
人電轉移黃素蛋白β肽(ETFB)免疫試劑盒    Human ETFB ELISA Kit

 

 


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