【溫馨提示】細胞用途：只可用于科研，不可用于臨床診斷和治療。
細胞名稱 犬腎細胞；MDCK(NBL-2)使用說明書
形態特性 上皮細胞
生長特性 貼壁生長
特征特性 1958年九月 S.H. Madin and N.B. Darby從一只外觀正常的成年雌性英國小獵犬的腎分離等到MDCK細胞株。角蛋白免疫過氧化物酶染色呈陽性。MDCK被用于研究β-粥樣蛋白前體的處理及其蛋白水解產物。
培養條件 MEM-EBSS: Minimum Essential Medium (MEM Eagles with Earle's Balanced Salts) 優質胎牛血清，10%
傳代方法 消化3-5分鐘。1:2。3天內可長滿。
傳代情況 P(55+5)
凍存條件 *培養基+8%DMSO
支原體檢測 陰性
STR
同工酶
染色體
使用權限 A類
| 產品名稱 | 犬腎細胞；MDCK(NBL-2)使用說明書 |
| 貨期 | 3－5天 |
| 發貨地 | 上海 |
犬腎細胞；MDCK(NBL-2)使用說明書復蘇操作要點：
1）將培養基在37℃水浴鍋預熱；準備一個15mL無菌的離心管，加入8mL預熱培養基。
2）將凍存細胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復溫（可準備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內，再逐步轉移到水浴鍋中）。輕輕晃動凍存管，使細胞能在1~2min內*解凍，使細胞能盡快通過zui易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BIU-87(人膀胱癌細胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內，將管內細胞轉移至準備好的離心管內，輕輕吹打液體，使細胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時避免產生氣泡。用新鮮培養基洗管壁2次，均轉移至離心管內。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養基，吹打制成細胞懸液。
5）將細胞懸液轉移至T25細胞瓶內，補加適量的培養基，輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻，放入溫箱內培養。
6）第二天觀察細胞貼壁生長情況，換新鮮培養基以去除死細胞。繼續培養，待細胞長至80~90%匯合
犬腎細胞；MDCK(NBL-2)使用說明書操作步驟：
1. 將無菌的蓋玻片置于細胞培養皿中，將細胞懸液接種于培養皿中進行細胞爬片，待細胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次，4%的多聚甲醛固定爬片15min，再次用PBS浸洗玻片3次，每次3min。
3. 0.5% Triton X-100（PBS配制）室溫孵育爬片20min，使細胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶，室溫孵育15min（一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫），PBS沖洗3次，每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min，PBS沖洗3次，每次3min。
6. 細胞特異性一抗孵育：按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗，滴加在爬片上，于4°C濕盒中孵育一夜，PBS沖洗3次，每次3min。
7. 二抗孵育：選與一抗對應的二抗，按比例稀釋后滴加在爬片上，37°C濕盒中孵育30min，PBS沖洗3次，每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干，爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下觀察，當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復染：用Harris蘇木素復染30s~1min，水洗后用1%的鹽酸酒精分化，再用蒸餾水（或PBS）水洗返藍。
10. 封片：將中性樹膠滴在爬片一側，再用蓋玻片蓋上，先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側，以免產生氣泡，封好的爬片平放置于通風廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
5,5-二甲基-1,3-環己二酮;醛試劑;1,1-二甲基環己烷-3,5-二酮;達米東;5,5-二甲基二氫*;1,1-二甲基-3,5-環己二酮 5,5-DiMethyl-1,3-cyclohexanedione;1,1-DiMethyl-3,5-cyclohexanedione;1,1-DiMethyl-3,5-diketocyclohexane;DiMethyldihydroresorcinol;Methone 126-81-8
壬烯基丁二酸酐 NONENYLSUCCINIC ANHYDRIDE 28928-97-4
刃天青鈉 Resazurin sodium salt 62758-13-8
日落黃 Food Yellow 3 2783-94-0
* LysozyMe froM chicken egg white BioCheMika 12650-88-3
肉豆蔻酸異丙酯（+4℃） NA
肉湯瓊脂培養基 Broth Agar Medium
乳化劑 EMULSIFIER
乳酸菌MRS瓊脂 （+4℃） NA
乳酸菌MRS肉湯 NA
乳酸鋰 LITHIUM LACTATE 867-55-0人ras同源物基因家族成員b(RHOB)免疫試劑盒 human RHOB ELISA Kit
人Prominin 2(PROM2)免疫試劑盒 Human PROM2 ELISA Kit
人Podocin 免疫試劑盒 Human podocin ELISA Kit
人PL7抗體/抗蘇氨酰tRNA合成酶(PL7)免疫試劑盒 Human anti-PL7-antibody ELISA Kit
人PL12抗體/抗丙氨酰tRNA合成酶(PL12/AlaRS)免疫試劑盒 Human anti-PL12-antibody,PL12/AlaRS ELISA Kit
人PC4,SFRS1互動蛋白1(PSIP1)免疫試劑盒 Human PSIP1 ELISA kit
犬腎細胞；MDCK(NBL-2)使用說明書人P53抗體免疫試劑盒 Human P53 antibody ELISA Kit
人P2蛋白抗體(IgM)免疫試劑盒 Human myelin protein two antibody IgM ELISA Kit
人P2蛋白抗體(IgG)免疫試劑盒 Human myelin protein two antibody IgG ELISA Kit
人P27蛋白(P27)免疫試劑盒 Human P27 protein ELISA Kit
