LAMP 可見光染料1mL說明書產品介紹:

LAMP 可見光染料1mL說明書產品及特點:
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長 cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉錄酶,內源 RNase H 活性低。
2. zui長可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫構建、RT-PCR、探針標記等。
合成建文庫用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或專一的 RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長度成反比。 RNase-free 水 補水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對富含二級結構的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應,放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應體系:
對照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或對照引物 2 uL
RNase-free 水 補水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉錄酶(含 RI),反應終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現 1.1Kb 的片段(如果使用隨機引物,將出現多個小片段)。
〖灼燒殘渣〗:≤0.1%
〖鐵〗:≤0.002%
銅:≤0.0005%
氨水溶解試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:白色棱柱體結晶性粉末。能與多種金屬離子形成絡合物。溶于氨水、氫氧化堿溶液,微溶于水(22.5℃時,1.28g溶于1L水),不溶于有機溶劑。飽和水溶液pH為2.3。〖熔點〗230~235℃(分解)(也有文獻報道為241.5℃分解)。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)絡合劑。測定多種陽離子(常用于鈣、鎂、〖鐵〗等)。金屬掩蔽劑。絡合滴定鈷、銅、鈥、鈮、〖鎳〗、〖鉛〗和稀土金屬。彩電顯影。
〖保存〗:RT
氯化血紅素
〖英文名稱〗:Hematin chloride;Hemin;Hematine hydrochloride;Chloroprotoporphyrin IX iron(III);1,3,5,8-Tetramethy1-2,4-divinylporphine-6,7-dipropionic acid ferrichloride;Chlorohemin;Chloroferriprotoporphyrin;Ferriheme chloride;Ferriporphyr in chloride
〖其他名稱〗:血晶素;血紅素;卟啉〖鐵〗;血晶;鹽酸血紅素;氯高〖鐵〗血紅素;氯化高〖鐵〗血紅素
〖CAS號〗:16009-13-5
C34H32C1N4FeO4=651.96
〖級別〗:BR
〖含量〗:≥98.0%
層析試驗:合格
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:紅褐色長片狀結晶或色粉末。牛血提取。對光敏感。在透射光下現棕色,在反射光下呈鋼藍色。易溶于稀氨水,溶于氫氧溶液生成血紅素,溶于強有機堿(如*胺和二甲苯胺)和乙酸,溶于濃硫酸而失去〖鐵〗,微溶于70%~80%乙醇,幾乎不溶于碳酸鹽溶液、稀酸和水,在水中穩定。在240℃結塊,在300℃也不熔化。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)血檢定染色劑
〖保存〗:2~8℃,避光
4-氯-1-萘酚
〖英文名稱〗:4C1N;4-CN;4-Chloro-1-naphthol
〖其他名稱〗:4-氯-α-萘酚;氯萘酚
Hydroxystilbamidine 大鼠白細胞分離液 1.084
Indo-1 AM 大鼠中性粒細胞分離液 1.091
Indo-1,五銨鹽 大鼠粒細胞分離液 1.119
JC-1 人細胞分離液 1.055
JC-10 人胰島細胞分離液 1.056
Lucigenin( 光澤精 ) 人內皮細胞分離液 1.060
Lyso-Tracker Red( 溶酶體紅色熒光探針 ) 人 NK 細胞分離液 1.062
MEQ,(6- 甲氧 -N- 乙基喹啉碘 ) * 1.075
Mito-Tracker Green( 線粒體綠色熒光探針 ) * 1.077
MM1-43(FM®1-43) * 1.077(FICOLL 配置 )
MM4-64(FM®4-64) 人白細胞分離液 1.078
Monobromobimane [mBBR] 人中性粒細胞分離液 1.085
MQAE( 氯離子熒光探針 ) 人粒細胞分離液 1.113
NAO 小鼠細胞分離液 1.070
NBD-Cl 小鼠內皮細胞分離液 1.071
Nile Red