真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次價(jià)格產(chǎn)品及特點(diǎn):
本試劑盒提供合成 cDNA *鏈所需要的全部試劑。其原理是用突變的莫洛尼氏 鼠白血病病毒反轉(zhuǎn)錄酶(M-MuLV RT)高效合成 mRNA 的全長(zhǎng) cDNA 拷貝。
1. 使用突變的反轉(zhuǎn)錄酶,內(nèi)源 RNase H 活性低。
2. zui長(zhǎng)可合成 13 Kb 的 cDNA。
3. 可以使用 oligo-dT、隨機(jī)引物和 RNA 專一性引物三種引物(前兩種本試劑盒提 供)。
4. 總 RNA、poly(A)+RNA 或特殊 RNA 均可作為模板。
5. 可用于 cDNA 文庫(kù)構(gòu)建、RT-PCR、探針標(biāo)記等。
真菌種屬鑒定 PCR Mix 2100 次價(jià)格合成建文庫(kù)用的 1st-strand cDNA:
1. 按下表配制 RT 反應(yīng)體系: RNA 模板 poly(A) mRNA 1 ug 或?qū)R坏?RNA 0.5-1 ug
注意:RNA 樣品不能含有基因組 DNA 污染。 引物 Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL 或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL 或 RNA 模板專一性引物 100 pmol 注意:隨機(jī)引物于 RNA 模板的比例跟 cDNA 合成的平均長(zhǎng)度成反比。 RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL 2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含 dNTP)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。對(duì)富含二級(jí)結(jié)構(gòu)的高 GC RNA 模板,可以改成 45℃保 溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則改成 25℃ 5 分鐘)。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然 后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。此步為 RT 反應(yīng)。
7. 70℃保溫 10 分鐘以終止反應(yīng),放置在冰上待用。合成的 cDNA 可以用于 第二鏈 cDNA 的合成或放置在-20℃*保存。
按下表配制 RT 反應(yīng)體系:
對(duì)照 RNA 模板(0.5 ug/uL) 2 uL
引物
Oligo (dT)18(0.5 ug/uL) 1 uL
或隨機(jī)引物(0.2 ug/uL) 1 uL
或?qū)φ找?2 uL
RNase-free 水 補(bǔ)水到 13 uL
2. 70℃保溫 5 分鐘后立即冰浴。
3. 再加入 5 uL RT Buffer(含標(biāo)記 dNTP,本試劑不提供)。
4. 37℃保溫 5 分鐘。如果使用隨機(jī)引物,則保溫溫度只能是 25℃。
5. 加入 2 uL MMLV 逆轉(zhuǎn)錄酶(含 RI),反應(yīng)終體積為 20uL。
6. 42℃保溫 60 分鐘(但如果使用隨機(jī)引物,需要先 25℃保溫 10 分鐘,然后再轉(zhuǎn)移到 42℃保溫 60 分鐘)。
7. 加 1uL 0.5M EDTA,放置在冰上待用。
8. 電泳檢測(cè)。合成的 cDNA 的量一般有加入 RNA 總量的 50%以上,電泳一般能出現(xiàn) 1.1Kb 的片段(如果使用隨機(jī)引物,將出現(xiàn)多個(gè)小片段)。
〖CAS號(hào)〗:81-88-9
C28H31ClN2O3=479.02
〖級(jí)別〗:AR
靈敏度試驗(yàn):合格
水溶解試驗(yàn):合格
〖灼燒殘?jiān)剑?le;0.25%
〖〖性狀〗(以下信息僅供參考)〗:綠色結(jié)晶或紅紫色粉末。易溶于水、乙醇,微溶于丙同、氯方、鹽酸和氫氧溶液(溶于約70分水,10分醇,150分氯方),水溶液為藍(lán)紅色,稀釋后有強(qiáng)烈熒光。約260℃熔結(jié),約280℃熔融。zui大吸收波長(zhǎng) 552nm。zui大熒光波長(zhǎng) 610nm。激光峰值波長(zhǎng) 610nm。調(diào)諧范圍 578~610nm。
〖用途〗:本品僅供科研,不得用于其它〖用途〗。(以下〖用途〗僅供參考)光度測(cè)定金、鎵、汞、銻(V)、駝(III),熒光測(cè)定錳、鈷等,比色測(cè)定鎘。氧化還原指示劑用以滴定錫、銻、鈮、鉭的沉淀劑。
〖保存〗:RT
3,3,5,5-四甲基聯(lián)苯胺
〖英文名稱〗:TMB;3,3,5,5-Tetramethyl benzidine;Tetramethylbenzidine
〖其他名稱〗:TMB游離酸;3,3’,5,5’-四甲基聯(lián)苯-4,4’-二胺;3,3',5,5'-四甲基對(duì)二氨基聯(lián)苯
〖CAS號(hào)〗:54827-17-7
C16H20N2=240.35
〖級(jí)別〗:BR
〖含量〗:≥99.0%
柱式白色念珠菌 RNAout 一管式 DNA 膠回收試劑盒
LB 平板培養(yǎng)基 無抗 一管式 TMB 顯色液 A( 可溶型 )
LB 平板培養(yǎng)基 (Amp 抗性 ) 一管式 TMB 顯色液 B ( 沉淀型 )
LB 平板培養(yǎng)基 (Kan 抗性 ) 一管式病毒 DNAout
LB 平板培養(yǎng)基 (Tet 抗性 ) 一管式病毒 DNAout
Protein A 磁珠 一管式病毒 DNA-RNAout
Protein G 磁珠 一管式病毒 RNAout
T4 RNA 連接酶 2( 雙鏈 RNA 連接酶 ) 一管式病毒 RNAout
T4 RNA 連接酶 2( 截短型 ) 一管式點(diǎn)突變?cè)噭┖?br />T4 RNA 連接酶 2( 截短型 K227Q) 一管式拭子 DNAout
M13mp18DNA 一管式拭子 DNAout
M13mp18DNA 一管式雙鏈 cDNA 合成試劑盒
φX174RF